عزل البكتيريا الملتحمة المساندة على المسحة: تقنية لعزل البكتيريا المتوافقة عن الملتحمة لنموذج الفئران

ملتحمة العين تؤوي بكتيريا تعايشية. تحمي هذه البكتيريا الأصلية العين من العدوى عن طريق تنشيط الخلايا المناعية لمهاجمة أي ميكروبات ضارة تدخل بطانات العين.

لعزل البكتيريا المتعايشة ، ضع فأر مخدر في وضع جانبي. خذ مسحة معقمة للعين مغموسة في وسط مناسب. أدخل طرف المسحة المبللة في منطقة الملتحمة الإنسية للعين اليسرى. اضغط على مقلة العين وحرك المسحة ذهابا وإيابا على طول الملتحمة لجمع مجموعة متنوعة من السكان.

قم بإزالة المسحة وحركها في أنبوب يحتوي على وسائط تخصيب ميكروبية. تطلق هذه الخطوة البكتيريا المحاصرة من شبكة القطن للمسحة في الوسائط. تخلص من المسحة واحتضان الأنبوب لتسهيل ظهور نمو البكتيريا.

ضعي بضع قطرات من الوسائط المخصبة الملقحة بمسحة العين على صفيحة أجار الدم بالنمط المطلوب واحتضنها. يوفر الكازين وببتون الصويا الموجودان في الوسائط النيتروجين اللازم لتخليق الببتيد بينما يحافظ كلوريد الصوديوم على التوازن التناضحي.

تمتلك

البكتيريا التوافقية إنزيمات الهيموليسين التي تهضم الهيموجلوبين الموجود في وسط الدم. ينتج عن هذا نمطا مميزا على صفيحة الأجار ، مما يتسبب في تكاثر البكتيريا المختلفة في مستعمرات متميزة شكليا. احسب عدد المستعمرات لتحديد وفرة نسبية في الملتحمة.

تأكد من تخدير الفأر بشكل صحيح عن طريق الضغط على وسادة القدم الخلفية. تابع فقط إذا لم تكن هناك حركة. قم بتعيين يد واحدة للتعامل مع