موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 4:51 دقيقة • July 8th, 2025
الصمام الأبهري للقلب عبارة عن بنية ثلاثية النشرات تتكون من الخلايا الخلالية للصمام الداخلي أو VICs موزعة في جميع أنحاء المصفوفة الكثيفة خارج الخلية والخلايا البطانية للصمام العلوي أو VECs.
لعزل VICs ، أولا ، قم بإعداد فأر مقتل رحيم في وضع ضعيف. من خلال شق البطن والصدر في خط الوسط، كشف القلب. قم بعمل شق صغير بين الأذين الأيسر والبطين متبوعا بالتروية المالحة لتصريف الدم. قطع الشريان الأورطي الصاعد على مستوى قوس الأبهر وحصاد القلب.
قمبتقطيع ثلثي البطينين البعيدين والتخلص منهما قبل تشريح الجزء المتبقي من القلب طوليا للكشف عن وريقات الصمام الأبهري "على شكل حرف U". استئصال المنشورات واشطفها بمحلول عازل مبرد لإزالة الدم.
بعد ذلك ، قم بمعالجة المنشورات بمحلول كولاجيناز منخفض التركيز واحتضانه. في التركيزات المنخفضة ، يقوم الكولاجيناز - وهو إنزيم محلل للبروتين - بتفكيك المصفوفة خارج الخلية جزئيا فقط ، مما يؤدي إلى إزاحة VECs السطحية من المنشورات.
جهاز طرد مركزي واستبدال المادة الطافية المحتوية على الإنزيم بمحلول مؤقت ، ونقل الحبيبات المعلقة إلى طبق بتري. اجمع المنشورات وعالجها بمحلول كولاجيناز عالي التركيز للهضم الثاني. عند الحضانة ، يؤدي الكولاجيناز إلى تدهور المصفوفة خارج الخلية ، مما يؤدي إلى إطلاق VICs في المحلول.
جهاز طرد مركزي لحبيبات VICs وإعادة تعليقها في وسائط مناسبة. أخيرا ، قم بز
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية