موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 2:52 دقيقة • July 8th, 2025
تستخدم أجنة الفئران كأنظمة نموذجية لدراسة التطور الجنيني المبكر للثدييات. لاستعادة أجنة الفئران في الفترة المحيطة بالولادة في المرحلة المرغوبة من التطور الجنيني ، ابدأ بفأر حامل تم القتل رحيم في وضع الاستلقاء.
بعد ذلك ، قم بتعقيم منطقة البطن وقم بعمل شق عرضي على جدار البطن للكشف عن قرون الرحم الأساسية. قرون الرحم عبارة عن هياكل أنبوبية طويلة تحتوي على سلسلة من الأجنة. الآن ، افصل قرون الرحم بعناية عن البطن عن طريق استئصالها من الأنسجة المحيطة.
انقل قرون الرحم المحصودة إلى طبق يحتوي على عازلة. اشطف قرون الرحم لإزالة بقايا الأنسجة والدم. علاوة على ذلك ، قم بشق بين مواقع الزرع على طول قرون الرحم لفصل كل جنين. استئصال طبقة المشيمة الأمومية ، جنبا إلى جنب مع قرص المشيمة المشتق من الجنين.
بعد ذلك ، قم بإزالة الهيكل الغشائي الصغير خارج الجنين المحيط بالجنين الذي يوفر التغذية له - كيس صفار البيض. أخيرا ، قم بإزالة الغشاء الأمنيوسي - الغشاء الأعمق خارج الجنين الذي يتكون من كيس مملوء بالسوائل يحيط بالجنين ويحميه - لتحرير جنين الفأر.
يمكن استخدام أجنة الفترة المحيطة بالولادة المستردة لدراسة التطور المبكر للثدييات.
نظف المقص والملقط التشريح بنسبة 70٪ من الإيثانول. لجمع أجنة الفترة المحيطة بالولادة عند E18.5 أو E19.5 ، أولا ، قتل الفئران الحامل باستخدام استنشاق ثاني أكسيد الكربون. ثم قم بإجراء خلع عنق الرحم وفقا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة.
بعد ذلك ، رش 70٪ من الإيثانول على سطح البطن البطني للحيوان. بعد ذلك ، باستخدام مقص التشريح المعقم والملقط ، افتح تجويف البطن في النهاية. ارفع الرحم بالكامل وافصله عن الجسم عند أطراف قرون الرحم. ثم اشطف الرحم بالكامل باستخدام 1x PBS في طبق بتري.
اقطع الرحم بشكل مقطعي باستخدام مقص تشريح وقم بإزالة المشيمة باستخدام ملقط تشريح لفضح الأجنة في أكياس الصفار. قم بإزالة كيس الصفار أولا ثم قم بإزالة الغشاء الأمنيوسي باستخدام ملقط تشريح لتحرير الأجنة في الفترة المحيطة بالولادة.