JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 3:48 د • July 8th, 2025
في نموذج الفأر لمرض السكري المعتمد على الأنسولين ، يتم حقن جزر البنكرياس عبر الوريد البابي الكبدي لأغراض علاجية. تنتج خلايا بيتا داخل مجموعة الجزر الأنسولين ، وهو هرمون ينظم مستويات الجلوكوز في الدم.
الحقن داخل البوابة هو تقنية بسيطة وفعالة ، لكن النزيف بعد الجراحة غالبا ما يؤدي إلى موت النموذجي. لمنع هذه المضاعفات ، قم بإعداد فأر مخدر في وضع ضعيف. احلق منطقة البطن واستخدم محلول مطهر. قم بعمل شق لفضح التجويف البريتوني. قم بإخراج الأمعاء من التجويف البريتوني على شاش رطب لفضح الوريد البابي السفلي.
خذ حقنة الأنسولين محملة مسبقا بالجزر الصغيرة. أدخل الإبرة بالتوازي مباشرة في الوريد البابي ، بحيث يكون شطبها متجها لأسفل. اسحب بعض الدم في حقنة لخلط الجزر ، ثم حقن ببطء. اسحب المكبس وادفعه عدة مرات لبث تعليق الجزيرة بالكامل. الآن ، ضع إسفنجة الجيلاتين لتغطية موقع الحقن.
يمتص الجيلاتين ، وهو مصفوفة مرقئة ، الدم ويتضخم لتشكيل جلطة مستقرة فوق موقع البزل ، وبالتالي توقف النزيف. بعد ذلك ، أعد الأمعاء إلى التجويف البريتوني وخياطة الشق. أعد الفأر إلى قفص منزله وراقب بانتظام علامات الشفاء.
بعد التأكد من عدم الاستجابة لمنعكس الدواسة ، ضع مرهما على العينين لمنع الجفاف. حلق بطن الفأر المخدر لإزالة الفراء ، وتطهير المنطقة الجراحية بثلاث مناديل متناوبة من 2٪ يود و 75٪ كحول.
بعد ذلك ، قم بعمل شق من 1 إلى 1.5 سم في البطن ، وافتح التجويف البريتوني. ضع قطعة معقمة من الشاش حول الشق واستخدم ملقطا أو أطراف قطنية لنقل الأمعاء برفق إلى الشاش. ثم قم بتغطية الأمعاء بقطعة من الشاش المنقوع بالمحلول الملحي ، وكشف الوريد البابي.
لوقف النزيف الناجم عن نقل الجزيرة باستخدام رغوة الجل ، أمسك الإبرة بحيث يكون الشطبة متجها لأسفل ، وضع طرف الإبرة مع الفتحة الموازية لجدار الوريد البوابي. قبل إدخال الإبرة في الوريد البابي ، اسحب المكبس لسحب 20 إلى 50 ميكرولترا من الدم في المحقنة لتختلط مع الجزر قبل ضخ الجزر في الوريد البابي أثناء الضغط على المكبس وسحبه بشكل متكرر.
عندما يتم تسليم جميع الجزر ، ضع حوالي 0.5 × 0.5 سم قطعة من رغوة الجل فوق موقع الحقن. استخدم طرفا قطنيا للضغط على رغوة الجل لأسفل ، مع إزالة الإبرة من الوريد البابي. أمسك الجل في مكانه لمدة دقيقتين تقريبا ، مع لف رغوة الجل للتأكد من أنها تغطي الوريد البابي.
بمجرد توقف النزيف ، أعد الأمعاء برفق إلى التجويف البريتوني في الموضع الأصلي وحقن 500 ميكرولتر من المحلول الملحي الدافئ في تجويف البطن. استخدم الغرز لإغلاق طبقات العضلات والجلد. بعد ذلك ، ضع الماوس في قفص نظيف على وسادة تدفئة مع المراقبة حتى الشفاء التام من التخدير ، وإعطاء التسكين كل 12 ساعة وتسخينه لمدة 48 ساعة.