تثبيت ضغط الصمام الرئوي المعزول للفأر: إجراء لعزل الصمام الرئوي للفأر وإصلاحه كيميائيا في شكل مغلق

للبدء ، قم بتأمين فأر قتل رحيم في وضع ضعيف. شق جانبي من خلال جدار الصدر للوصول إلى التجويف الصدري وفضح القلب. استئصال الأذين الأيمن وحقن المحلول الملحي في البطين الأيسر لتصريف الدم من القلب.

قطع الوصلات الوعائية عن طريق قطع الأوعية الدموية الرئيسية. علاوة على ذلك ، قم بشق الشريان الرئوي على مسافة مناسبة من التقاطع البطيني الشرياني ، والذي يعمل كقناة للضغط. قم بإزالة البطينين لتعريض الجانب البطيني للضغط الجوي.

الآن ، قم بتأمين أنبوب ضغط في الشريان الرئوي ، مما يضمن خلوصا كافيا بين الوصلة البطينية الشريانية ونهاية الأنبوب للسماح لريقات الصمام بالتحرك أثناء الضغط.

بالأنبوب ، قم بتوصيل الخزان المملوء بالمحلول الملحي المثبت بارتفاع محسوب بالنسبة للصمام الرئوي بناء على الضغط الهيدروستاتيكي المطلوب ليتم تطبيقه على الجانب الشرياني للصمام. يؤدي التدفق أحادي الاتجاه من الجانب الشرياني مع الضغط الهيدروستاتيكي المطبق إلى إغلاق وريقات الصمام وانتفاخ الجذع الرئوي.

بعد ذلك ، أدخل مثبتا مناسبا في الخزان واستمر في التروية. يعمل المثبت المنفخ على استقرار التشكل الخلوي وبنية الأنسجة.

ضع شاشا مبللا بالمثبت فوق الأنسجة لتثبيت الأنسجة المحيطة بالصمام ومنع الجفاف. قم بتخزين صمام القلب الثابت في مثبت حتى الاستخدام.

ابدأ بتعقيم الأدوات اللازمة لتشريح الماوس ، بما في ذلك المقص الناعم ، والملقط الدقيق ، والمشابك الوعائية الدقيقة ، والملقط الذي يطبق المشبك ، وحاملات الإبر الدقيقة ، ومقص الزنبرك ، والمباعدات.

بعد القتل الرحيم لفأر C57 Black 6 البالغ ، ضعه في وضع الاستلقاء الظهري على صينية ، وقم بتأمين أطرافه بشريط لاصق ، وقم بإجراء بضع الصدر. كشف القلب عن طريق إزالة أي أنسجة دهنية زائدة واللفافة ، ثم قم بإزالة الأذين الأيمن ، وقم بنفخ البطين الأيسر بمحلول ملحي بدرجة حرارة الغرفة.

قم بإزالة القلب بالكامل عن طريق قطع الوريد الأجوف العلوي ، والوريد الأجوف السفلي ، والشريان الرئوي ، والشريان الأورطي ، وقطع حوالي 2 ملم فوق التقاطع البطيني الشرياني ، والذي سيكون بمثابة قناة للضغط.

قم بإزالة البطينين الأيمن والأيسر لتعريض الغرف للضغط الجوي ، مما يضمن عدم تأثر بنية الجذع الرئوي بإزالة البطينين. أنبوب ضغط Anastomose مع الشريان الرئوي ، تاركا مسافة 1 ملليمتر تقريبا بين التقاطع الأنبوبي الصيني ونهاية الأنبوب ، لاستيعاب الحركات الكبيرة للوريقات والجذع الرئوي.

ارفع الخزان إلى ضغط فسيولوجي مماثل واملأه بالمحلول الملحي. اختبر نظام التدفق للتأكد من عدم وجود انسداد أو فقاعات هواء. قم بتوصيل محبس بالصمام الرئوي المفغر ، وتأكد من التدفق الكافي عبر الأنبوب عن طريق تبديل مجرى التدفق. بمجرد أن يصبح التدفق كافيا ، قم بتحويل التدفق إلى الصمام الرئوي المفاغرة ، وتأكد من ضغط الجذع الرئوي ، الذي يتم تحديده عن طريق انتفاخ الجذع.

بعد التأكد من ضغط الجذع الرئوي ، قم بدمج محلول التثبيت الأولي تدريجيا ، حتى يتم تطهير 25٪ من سعة الخزان للمحلول الملحي. ضع شاشا مبللا بالمثبت فوق عينة الأنسجة لمنع الجفاف. قم بنشر المثبت لمدة 3 ساعات ، وأعد ملء الخزان للحفاظ على ضغط ثابت.

بعد التروية ، قم بتخزين صمام القلب في محلول التثبيت عند 4 درجات مئوية حتى الاستخدام ، لمدة تصل إلى أسبوع واحد.