موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:21 دقيقة • July 8th, 2025
الأوعية اللمفاوية في أدمة الجلد وتتمثل وظيفتها في إزالة السائل الخلالي الزائد من الأنسجة. يؤدي تلف الأوعية اللمفاوية إلى تراكم السوائل الزائدة في الفضاء الخلالي وزيادة الترسب تحت الجلد للأنسجة الليفية والدهنية. تؤدي هذه التغييرات إلى الوذمة اللمفية.
لتوليد الوذمة اللمفية في ذيل الفئران ، خذ فأرا مخدرا وضعه في وضع الانبطاح. قم بإجراء استئصال محيطي للجلد بسماكة كاملة في مكان بعيد بشكل مناسب ، بعيدا عن قاعدة الذيل. شق موقع آخر على الذيل أدنى من القطع الأول.
قم بعمل شق جلدي عمودي يربط بين الشقوق المعدة مسبقا. باستخدام هذا القطع ، قم باستئصال رقعة الجلد المتراكبة لكشف الأوردة الجانبية والأوعية اللمفاوية.
خذ حقنة تحتوي على صبغة تتبع ملونة وحقنها تحت الجلد بالقرب من نهاية الذيل ، مما يجعل الأوعية اللمفاوية تبدو زرقاء. قم بتوصيل الأوعية اللمفاوية ، ولف موقع الجرح ، وراقب الماوس للمدة الزمنية المطلوبة.
يوقف التشريح المجهري تدفق الليمفاوية في الأوعية ويتجمع السائل في مساحة الأنسجة. وبالتالي ، لوحظ أن الوذمة اللمفية المستمرة هي تورم في ظهر ذيل الفأر إلى موقع الجراحة.
للبدء ، ضع الفأر المخدر البالغ من العمر 8 أسابيع بشكل صارم ، وقم بإعداد الذيل بكحول الأيزوبروبيل بنسبة 70٪. استخدم الفرجار لقياس قطر الذيل بزيادات قدرها 5 ملم تبدأ من 20 ملم من قاعدة الذيل. ضع علامة على شق محيطي بطول 3 ملم على الذيل على بعد 20 ملم من القاعدة.
تحت التكبير المجهري الجراحي ، قم بإجراء استئصال دقيق للجلد بسماكة كاملة بطول 3 ملم ، مع ترك جميع الأوعية الدموية الأساسية سليمة. شق علامة محيطية علوية ، أولا من خلال الأدمة ، متبوعا بشق محيطي كامل السماكة 3 ملليمترات بعيدا عن الشق الأول. قم بعمل شق رأسي عمودي كامل السماكة لتوصيل الشقوق ، ثم استخدم الالتقاط الدقيق المسنن للإمساك بالحافة الأمامية وتشريح عميق داخل المستوى اللاوعائي إلى الأدمة والسطحي إلى الوريد الخفيف ، باستخدام مقص دقيق.
حقن 0.1 مليلتر من 1٪ الأيزوسلفان الأزرق تحت الجلد قريب من طرف الذيل. تحديد القناتين اللمفاويين اللتين تظهران باللون الأزرق بسبب الحقن ، بجوار أوردة الذيل الجانبية. قم بتقطيع اللمفاوية بعناية ، وتشريح مستوى بين الوريد الجانبي واللمفاوي باستخدام مقص جراحي مجهري مستقيم. مرر طرف شفرة مقصية واحدة بين الوعاء اللمفاوي والوريد الجانبي ، وأغلق الشفرات لعبور الوعاء اللمفاوي. عند الانتهاء ، قم بتضميد جرح الذيل بضمادة شفافة معقمة ملتصقة.