JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 2:53 د • July 8th, 2025
تحدث عدوى المسالك البولية ، أو التهاب المسالك البولية ، في المقام الأول بسبب استعمار بكتيريا الإشريكية القولونية المسببة للبول في الكلى أو الحالب أو المثانة أو مجرى البول.
لإنشاء نموذج فأر المسالك البولية ، ابدأ بوضع فأر مخدر في وضع ضعيف. باستخدام المجهر المجسم، تصور منطقة أسفل البطن في الفأر لتحديد فتحة مجرى البول الوردية العميقة.
الآن ، خذ حقنة تحتوي على المحلول البكتيري الممرض للبول المطلوب مع طرف قسطرة وعائية متصل بها. أدخل القسطرة بشكل عمودي في مجرى البول. قم بإمالة المحقنة لوضعها أفقيا ، وادفعها أكثر حتى تصل إلى المثانة البولية.
ثم قم بغرس اللقاح البكتيري ببطء في المثانة. حافظ على المحقنة والقسطرة في مكانها للمدة المطلوبة لمنع التسرب. اسحب القسطرة ببطء من مجرى البول واترك البكتيريا تتكاثر.
بمجرد دخولها ، تغزو البكتيريا الخلايا الظهارية السطحية للمثانة ، حيث تتكاثر لتشكيل مجتمعات بكتيرية داخل الخلايا ، أو IBCs ، في سيتوبلازم هذه الخلايا.
في النهاية ، تطلق هذه البكتيريا في تجويف المثانة ، حيث تصيب الخلايا المجاورة ، مما يتسبب في انتشار العدوى.
نموذج الفئران المسالك البولية جاهز الآن لمزيد من التحليل النهائي.
قم بتركيب طرف قسطرة وعائية معقمة عيار 24 على حقنة سعة 100 ميكرولتر. املأ المحقنة بالمحلول البكتيري المحضر. ضع واحدا على سطح عمل في وضع الاستلقاء ، وحافظ على تخدير الأيزوفلوران المستقر ، باستخدام مخروط الأنف أثناء التقطير. ضع مرهم العين. طرد البول المتبقي عن طريق تطبيق ضغط لطيف ، والقيام بحركات دائرية على المنطقة فوق العانة. ثم نظف أسفل البطن بنسبة 70٪ من الإيثانول.
قم بتليين طرف القسطرة بمحلول ملحي عادي. ضع إصبع السبابة لليد غير المهيمنة على البطن وادفعها برفق لأعلى. ابدأ قسطرة مجرى البول عموديا بزاوية 90 درجة. بمجرد مواجهة المقاومة ، قم بإمالتها أفقيا قبل إدخالها أكثر. قم بإجراء تقطير بطيء ل 50 ميكرولتر من اللقاح البكتيري. بعد التقطير ، احتفظ بالمحقنة والقسطرة في مكانها لبضع ثوان أخرى ، ثم تراجع ببطء لمنع التسرب.