موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 2:48 دقيقة • July 8th, 2025
تحفز الخزعات الموجهة بالمنظار في نماذج الفئران مواقع الجرح في القولون. يتم عزل أسرة الجروح هذه للدراسات الجزيئية والنسيجية لفهم عملية التئام الجروح في الأمراض الالتهابية في الجهاز الهضمي أو الجهاز الهضمي.
لبدء عزل سرير الجرح ، ضع فأرا تجريبيا مرفوعا مع جرح ناتج عن القولون في وضع الاستلقاء. شق جلد البطن والعضلات الأساسية لكشف تجويف الجسم.
ضع مقصا مغلقا تحت القولون وارفعه. قطع القولون عند منتصف نقطة الظهر ، وفي فتحة الشرج لفصله عن الجسم. اغسل القولون بمخزن مؤقت مناسب لإزالة محتوى البراز.
ضع القولون على ورق ترشيح واقطعه مفتوحا طوليا ، بحيث يكون الجانب المساريقي متجها لأسفل على ورق الترشيح. الآن ، أضف صبغة الميثيلين الزرقاء فوق القولون وراقب تحت المجهر.
تلطخ الصبغة الأنسجة الميتة والحبيبية في فراش الجرح ، مما يجعلها تبدو أغمق من الأنسجة السليمة المحيطة ، مما يسمح بالتعرف عليها بسهولة. الحفاظ على سرير الجرح المعزول لدراسات التعبير الجيني.
عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة ، افتح طبقات الجلد وعضلات البطن لفضح تجويف جسم التجربة ، وضع ملقط مغلق تحت القولون. ارفع القولون برفق لتحريره من المساريق الأساسي ، وقم بقطع الأنسجة عند منتصف نقطة الظهر وعند فتحة الشرج لجمعها من الفأر.
استخدم حقنة سعة 20 ملليلتر مملوءة ب PBS المثلج ، ومجهزة بإبرة تزقيم الفئران ، لطرد محتويات البراز ؛ ووضع القولون الذي تم تطهيره على قطعة من ورق الترشيح. افتح القولون طوليا ، مع الحرص على أن يكون الجانب المساريقي متجها لأسفل مقابل ورق الترشيح ، واستخدم ماصة باستور لتغطية الغشاء المخاطي ب 0.2٪ أزرق الميثيلين.
بعد بضع ثوان ، قم بتصريف البقعة الزائدة وعرض القولون تحت مجهر تشريح لتحديد موقع فراش الجرح. استخدم مقص قزحية صغيرة مقاس 4 بوصات لقطع حافة السرير ، مع الحرص على عدم قطع طبقة العضلات ، واستخدم ملاقط دقيقة لنقل الأنسجة المقطعة إلى أنبوب للتجميد و / أو التخزين.