نموذج الحلقة اللفائفية للفأر: نموذج جراحي لدراسة نفاذية الأمعاء في الفأر

في ظل الظروف المرضية ، يؤدي تفكك الحواجز الظهارية والبطانية إلى زيادة نفاذية الأمعاء ، مما يتسبب في تسرب محتويات الأمعاء إلى الأوعية الدموية المحيطة وتجويف البطن. يمكن محاكاة نفاذية الأمعاء باستخدام نموذج الحلقة اللفائفية.

للبدء ، قم بإعداد فأر مخدر في وضع ضعيف. قم بعمل شق خط الوسط في البطن. ضع شاشا قطنيا معقما مبللا بمخزن مؤقت مناسب فوق منطقة الجراحة للحفاظ على رطوبة الأعضاء أثناء الجراحة.

قم بإخراج الدقاق - الجزء البعيد من الأمعاء - ووزعه على الشاش لكشف المساريق. تحديد موقعين للربط في الدقاق متباعدة بشكل مناسب في المساريق ويخلو من أي أوعية دموية حرجة. ثم اخترق المساريق لإضافة أربطة في المواقع المحددة.

بعد ذلك ، قم بتشريح الدقاق لتوليد حلقة لفائفية معزولة مع إمدادات دم سليمة وغشاء مساريقي. بعد ذلك ، قم بحقن مخزن مؤقت مناسب في الحلقة لطرد محتوى النفايات.

الآن ، قم بربط الأطراف المفتوحة للحلقة اللفائفية. استخدم حقنة لحقن الكيموكين - معلق البروتين الكيميائي - في الحلقة ، مما يؤدي إلى انتفاخه. أعد الأعضاء إلى البطن.

خياطة الشق. اسمح للماوس بالتعافي. في النهاية ، تمر جزيئات الكيموكين عبر الجدار اللفائفي إلى الأوعية الدموية المجاورة ، مما يسبب الالتهاب وتدفق الكريات البيض.

بعد تحقيق مستوى جراحي للتخدير ، ابدأ بفرك فرو خط الوسط البطني بمسحات كحولية ، أو إسفنجة شاش مبللة بنسبة 70٪ من الإيثانول. لا تبلل مساحة واسعة من الفراء بالكحول لمنع انخفاض حرارة الجسم. باستخدام المقص ، قم بإجراء بضع البطن في خط الوسط. قم بعمل شق أفقي في منتصف البطن ، وفضح الصفاق ، مع الحرص على عدم إصابة الأعضاء داخل البطن.

ضع شاشا قطنيا مبللا مقطوعا مسبقا فوق التجويف المكشوف داخل البطن. استخدم مسحات قطنية مبللة لتعبئة الرأس وإزالته من الخارج ، وضعه بعناية على شاش قطني مبلل. ثم قم بتعبئة الدقاق وإخراجه برفق. انشر ما لا يقل عن 6 سنتيمترات من الدقاق الطرفي على شاش القطن الرطب دون تعطيل الأوعية المساريقية وإمدادات الدم.

حافظ على رطوبة الأنسجة المكشوفة في جميع الأوقات باستخدام HBSS الدافئ. تحديد الشريان الرئيسي الذي يغذي الدقاق في المساريق بالقرب من الأعور. بعد ذلك ، حدد موقعي ربط في المساريق خاليين من الأوعية الدموية الحرجة. أمسك الدقاق الطرفي بإحكام باستخدام ملقط نسيجي غير حاد واستخدم ملقطا رفيعا لإزالة المساريق ، وتجنب الأوعية الدموية.

ضع خياطة الحرير عبر الثقب واربط عقدة جراحية لإنشاء الربط الأول. استخدم المسطرة لقياس 4 سم بعيدا عن الرباط الأول ، وقم بإنشاء الرباط الثاني. قم بقص بعناية بجانب كل ربط بمقص ناعم لعزل الحلقة اللفائفية التي يبلغ طولها 4 سم ، مع الحفاظ على إمدادات الدم والغشاء المساريقي سليمين.

اغسل محتوى الجزء الدائري اللفائفي برفق باستخدام HBSS دافئ باستخدام أنبوب تغذية أصفر مرن متصل بحقنة سعة 10 ملليلتر. تأكد من طرد المحتويات اللمعية من تجويف البطن للحفاظ على نظافة موقع الجراحة. اربط طرفي الحلقة اللفائفية المتوهجة بخياطة حريرية.

استخدم حقنة سعة 1 مليلتر بإبرة قياس 30 لحقن 250 ميكرولتر من الكاشف ببطء ، مثل FITC-dextarens أو chemokine في تجويف الأمعاء. سوف تنتفخ الحلقة اللفائفية ، مما يتسبب في انتفاخ معتدل في الغشاء المخاطي.

أغلق جدار البطن باستخدام حامل إبرة ، وملقط تشريحي ، و 3.0 خيوط حريرية غير قابلة للامتصاص بإبرة قطع عكسية. بعد تجفيف لمنع انخفاض حرارة الجسم ، ضعه في غرفة تخدير منظمة لدرجة الحرارة لفترة الحضانة.