نموذج التهاب باطن المقلة الجرثومي للفأر: طريقة لتوليد التهاب باطن المقلة الجرثومي عن طريق الحقن داخل الجسم الزجاجي للتعليق البكتيري في عين الفأر

التهاب باطن المقلة الجرثومي هو عدوى التهابية في العين بسبب غزو بكتيريا Bacillus cereus داخل العين.

لتوليد التهاب باطن المقلة الجرثومي في نموذج الفأر ، ضع فأر مخدر بشكل جانبي على لوح الجراحة. قم بتثبيت الجلد المحيط بالعينين لإزاحة مقلة العين وتحديد موقع منطقة الأطراف — وهي نقطة تقاطع بين الصلبة والقرنية في العين.

خذ إبرة مملوءة مسبقا بتعليق ثقافة Bacillus cereus. أدخل الإبرة في طيفي الأطراف واثقب المنطقة المتوسطة الزجاجية. بعد ذلك ، قم بحقن المعلق البكتيري داخل الجسم الزجاجي ، وإطلاق البكتيريا في التجويف الزجاجي للعين.

الآن ، قم بإزالة الإبرة واسمح لمقلة العين باستعادة وضعها الطبيعي. انقل الماوس إلى قفص وراقب انتشار العدوى البكتيرية. بمجرد دخولها ، تتكاثر البكتيريا بسرعة لزيادة عددها. بعد ذلك ، تستخدم هذه البكتيريا سوطها للهجرة نحو شبكية العين.

عند الوصول إلى مساحة الشبكية الزجاجية ، تفرز البكتيريا السموم والإنزيمات التي تساعدها في غزو شبكية العين. داخل شبكية العين ، تنشط بروتينات الغلاف البكتيري خلايا مولر الشبكية ، مما ينتج عنه وسطاء التهابيون لتجنيد الخلايا الالتهابية التي تلحق الضرر بخلايا الشبكية الحساسة. في النهاية ، يؤدي تدفق الخلايا الالتهابية إلى داخل العين إلى التهاب باطن المقلة في عين الفأر.

للحقن داخل الجسم الزجاجي ، قم بتشغيل الحاقن الدقيق وافتح صمام الغاز الموجود على خزان الهواء المضغوط المتصل بالحاقن الدقيق. اضغط على "الوضع" على الحاقن حتى تظهر الشاشة "التوازن". اضغط على "Balance" وضع ماوس الكمبيوتر على طاولة التشغيل. قم بتوصيل حامل الماصة المصنوع من الفولاذ المقاوم للصدأ بالأنبوب المتصل ب "التعبئة/الإخراج" على الحاقن، وقم بربط موصل حامل الماصة بإحكام حول إبرة طرف الماصة الشعرية الزجاجية المشطوفة للسماح بإدخال الإبرة الشعرية في الطرف الآخر من حامل الماصة.

قم بتشغيل مجهر العيون واضبط شدة الضوء على 50٪. ضع المجهر على جانب الإجراء واضبط المجهر على التركيز المطلوب. بعد التأكد من عدم الاستجابة لارتجاع الدواسة ، ضع الفأر المخدر على جانبه الأيسر على الوسادات السفلية الطبية مع توجيه الأنف إلى اليمين.

حدد موقع العين اليمنى من خلال هدف مجهر العين وضع ملقط الملقط ذو التأثير العكسي على جانبي العين لكشف موقع الحقن. انقر بزر الماوس الأيسر على الماوس المتصل بالحاقن الدقيق لملء الإبرة الشعرية المحضرة بالمحلول البكتيري المخفف ، وتأمين الرأس باليد اليسرى ، ضع طرف الإبرة ، الجانب المائل لأعلى عند طرف العين.

باستخدام الإبرة بزاوية 45 درجة ، قم بثقب العين ، مع الحرص على إدخال 0.5 ملم فقط من الطرف الحاد للإبرة. بمجرد إدخال طرف الإبرة ، استخدم اليد اليسرى للنقر الأيمن على لوحة الماوس لحقن 0.5 ميكرولتر من محلول B. cereus. لمنع التسرب ، اترك طرف الإبرة داخل عين الفأر لمدة 2 إلى 3 ثوان قبل إزالته. بعد ذلك ، حرر الملقط وستعود العين إلى التجويف من تلقاء نفسها. انقل الماوس إلى قفص التعافي على وسادة الاحترار مع المراقبة حتى الاستلقاء الكامل.