JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 3:02 د • July 8th, 2025
بويضة الخنازير محاطة بمجموعة مدمجة متعددة الطبقات من الخلايا الركامية التي تشكل مركب البويضات الركامية أو COC. تعمل الخلايا الركامية الأعمق على تمديد العمليات من خلال المنطقة الشفافة للبويضة. تعمل هذه العمليات على تطوير كل من الفجوة والوصلات الوسيطة ، مما يساعد في النقل بين الخلايا للجزيئات بين البويضة والخلايا الركامية المحيطة. تحافظ هذه التفاعلات ثنائية الاتجاه على جدوى COCs والتي تعد محددا حاسما للتخصيب في المختبر الناجح أو أطفال الأنابيب.
لعزل COCs ، اغمر عددا قليلا من بصيلات المبيض الخنازير في طبق بتري يحتوي على وسط النضج. تحتوي هذه الوسائط على هرمونات ضرورية لنضج البويضات في المختبر. قم بتشريح بصيلات المبيض لإطلاق COCs والسائل المسامي في طبق بتري. يكمل هذا السائل وسط النضج بعناصر غذائية وهرمونات إضافية ضرورية لكفاءة البويضات.
استنشق محتوى البصيلات المنبعث ونقله إلى طبق بتري آخر. تخيل اللوحة تحت المجهر لتحديد COCs غير التالفة التي تظهر مورفولوجيا طبيعية تتكون من بويضات مستديرة ذات سيتوبلازم حبيبي معتدل وجسم قطبي سليم محاط بالخلايا الركامية.
اعزل COC واحد ونقله إلى البئر المركزي المحتوي على وسائط النضج للوحة التلقيح الاصطناعي. قم بتخزين الطبق في درجة حرارة مثالية حتى الاستخدام الآخر.
لعزل COCs عن البصيلات متوسطة الحجم ، انقل اثنين إلى ثلاثة مبيضين إلى طبق بتري معقم مقاس 10 سم مملوء ب HM. قم بقطع سطح بصيلات المبيض البارزة برفق بشفرة جراحية معقمة # 15 ، مما يؤدي إلى تدفق السائل الجريبي ، و COCs إلى طبق بتري. قم بشفط محتويات البصيلات بإبرة قياس 28 متصلة بحقنة يمكن التخلص منها ، وانقلها إلى طبق بتري آخر.
لتحضير أطباق بتري التلقيح الاصطناعي ، أضف 1 مليلتر من HM إلى الآبار المركزية ، وضع ثلاث إلى أربع قطرات من HM في الحلقات الخارجية. بعد ذلك ، استخدم ماصة دقيقة من البولي كربونات لنقل COCs غير التالفة إلى قطرات HM في الحلقات الخارجية ، واشطفها لفترة وجيزة ثلاث إلى أربع مرات. عند الانتهاء ، انقلها بشكل فردي إلى البئر المركزي. قم بتخزين لوحات التلقيح الاصطناعي في الحاضنة.
توضح هذه المقالة بروتوكولاً مفصلاً لعزل معقدات الخلايا الركامية والبويضات (COCs) من مبايض الخنازير. وتعد معقدات COCs المعزولة ضرورية لدراسات الإخصاب في المختبر (IVF) وعلاجات الخصوبة، حيث إنها تحافظ على حيوية البويضات وقدرتها التطورية.
يعد العزل الموثوق لمعقدات الخلايا المكمشة والبويضات (COCs) في الخنازير ركيزة أساسية لأبحاث بيولوجيا التكاثر والخصوبة في مراحلها المبكرة، مما يتيح إجراء دراسات الإخصاب المختبري (IVF) تحت ظروف محكومة. وتدعم هذه التقنية الثقة التنبؤية في حيوية البويضة وكفاءتها التطورية، مما يؤثر بشكل مباشر على تطوير المقاييس ودقة النماذج الانتقالية. ويعد التحضير الموحد لمعقدات COCs ضرورياً لضمان سير عمل قابل للتوسع وإعادة الإنتاج في مسارات التكنولوجيا التناسلية.
يتناسب بروتوكول عزل COC هذا مع المرحلة الفاصلة بين الاكتشاف المبكر وتطوير المقايسات، حيث يوفر مادة أساسية لدراسات التلقيح الاصطناعي في المختبر (IVF)، والنضج، والكفاءة التطورية.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026