نظام المفاعل الحيوي الميكروبي للرخام السائل: بروتوكول ثقافة ثلاثي الأبعاد لتغليف بويضات الخنازير

قم بإعداد طبقة من مسحوق الإيثيلين البروبيلين المفلور ، أو FEP ، في طبق ثقافة. أضف قطرة من وسط النضج الذي يحتوي على مجمعات الركامية والبويضات ، أو COCs ، على مسحوق FEP. قم بلف القطرة برفق فوق المسحوق لتشكيل رخام سائل أو LM. يخلق مسحوق FEP غلافا مساميا كارها للماء ، مما يسمح بتبادل الغازات بين السائل الداخلي والبيئة المحيطة.

الآن ، اجمع وحدة LM ونقلها إلى البئر المركزي لطبق بتري التلقيح الاصطناعي. أضف الماء المعقم إلى الحلقة الخارجية للحفاظ على رطوبة COCs. بعد ذلك ، قم باحتضان LM في ظل ظروف فسيولوجية للسماح بنضوج البويضات.

بعد ذلك ، قم بإزالة الوسط المستهلك وأضف وسط نضج جديد. يؤدي التلامس المباشر للسائل إلى تعطيل غلاف FEP الكارهة للماء ويكسر LM لإطلاق COCs. انقل COCs التي تم إطلاقها إلى طبق جديد يحتوي على قطرة جديدة من وسط النضج واغسلها لإزالة جزيئات FEP.

بعد الغسيل ، انقل COCs والوسط الطازج إلى طبقة مسحوق FEP. لف القطرة لتغطيتها بالمسحوق. أخيرا ، انقل LM إلى طبق بتري التلقيح الاصطناعي. تحافظ LMs المطلية بالمسحوق FEP على الهيكل ثلاثي الأبعاد للبويضات وتعزز قدرتها على البقاء.

اصنع سريرا من 5 جرامات من مسحوق FEP في طبق بتري مقاس 30 ملم. وزعي قطرة واحدة من وسط النضج ، تحتوي على 3 إلى 5 COCs على مسحوق FEP. قم بتدوير اللوحة برفق في حركة دائرية للتأكد من أن الجسيمات تغطي سطح قطرة السائل با