موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:04 دقيقة • July 8th, 2025
لإنشاء نموذج عدوى بكتيرية في العظام ، ابدأ بوضع أرنب مخدر في وضع جانبي. قم بإزالة الفراء من الطرف الخلفي لتحديد موقع الساق - العظم الذي يربط الركبة بالكاحل. ضع علامة على نقطة مجاورة لهضبة الظنبوب - الطرف القريب من عظم الساق.
شق الجلد والسمحاق - طبقة من الأنسجة حول العظام - لتعريض الساق. باستخدام المرجع المحدد ، قم بعمل تجويف في نخاع العظام. أدخل سدادة شمع عظمي في التجويف. خياطة السمحاق وطبقات الجلد.
بعد ذلك ، خذ حقنة تحتوي على محلول المكورات العنقودية الذهبية. اثقب الإبرة من خلال سدادة شمع العظام وتلقيح المحلول البكتيري في نخاع العظام. أخرج الإبرة. انقل الأرنب إلى قفص وراقب انتشار العدوى.
تمنع سدادة شمع العظام تسرب المعلق البكتيري ، مما يسمح للبكتيريا بالتكاثر في نخاع العظام. تجذب هذه البكتيريا الكريات البيض والعوامل الالتهابية التي تؤدي إلى التهاب العظم والنقي - وهو التهاب في العظام يسبب انخفاض تدفق الدم.
تؤدي هذه الظروف في النهاية إلى تكوين sequestrum - منطقة نخرية في العظام خالية من إمدادات الدم. تتسلل البكتيريا إلى هذه المنطقة للهروب من العلاج بالمضادات الحيوية ، مما يؤدي إلى عدوى مزمنة.
لإعداد قالب عدوى العظام ، تأكد من عدم الاستجابة لقرص المخلب في أرنب أبيض نيوزيلندي يبلغ من العمر ثلاثة أشهر يبلغ من العمر 3 كيلوغرامات ، واستخدم ماكينة حلاقة كهربائية لإزالة الشعر من منطقة الظنبوب القريبة عكس اتجاه نمو الشعر. تطهير الجلد المكشوف بمحلول بوفيدون اليود ، واستخدم قلما ومسطرة لتحديد الطرف العلوي من الساق ، وموضع ثقب الحفر لحقن المكورات العنقودية الذهبية ، مع الحرص على أن يكون موضع ثقب الحفر في المنتصف الأفقي لهضبة الظنبوب.
بعد ذلك ، استخدم مشرطا # 11 لعمل شق في الجلد ، متبوعا بشق 1 سم في الصفاق. باستخدام وحدة حفر العظام الكهربائية ، قم بعمل ثقب قطره 2 ملم في الظنبوب ، واضغط على الفتحة بقطر 2 ملم وطول 2 ملم ، أسطوانة من شمع العظام. قم بإزالة أي شمع عظمي احتياطي على طول المستوى الأفقي لهضبة الظنبوبة ، وتأكد من أن الثقب مليء بشمع العظام.
بعد ذلك ، استخدم خيوطا جراحية قابلة للامتصاص لخياطة السمحاق والجلد ، في خياطة مرتبة عمودية لمنع من مضغ الغرز ، واستخدم حاقن التعقيم سعة 1 مليلتر لحقن 1 × 108 CFU / مل ببطء من محلول المكورات العنقودية الذهبية في حفرة الحفر.