موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:15 دقيقة • July 8th, 2025
تزجيج الأجنة هو تقنية حفظ تجميد فائقة السرعة تعمل على تبريد الأجنة بمعدلات عالية للغاية إلى درجات حرارة منخفضة للغاية ، مما يسهل تخزينها على المدى الطويل.
للبدء ، خذ أجنة الأرانب المحصودة في وسائط مناسبة. احتضان الأجنة بمحلول متوازن يحتوي على تركيزات منخفضة من المواد البردية المتغلغلة للخلايا - جلايكول الإيثيلين ، أو EG ، وثنائي ميثيل سلفوكسيد ، أو DMSO. ينتشر EG و DMSO عبر أغشية الخلايا ، ويحل محل جزيئات الماء داخل الخلايا ويمنع تكوين بلورات الجليد داخل الخلايا.
بعد ذلك ، قم باحتضان الأجنة بمحلول تزجيج يحتوي على تركيزات أعلى من EG و DMSO لتمكين الاختراق الكافي للمواد المجمدة بالتبريد وتدفق الماء الكافي داخل الخلايا ، مما يحمي الخلايا من تلف التجمد.
قم بإقران حامل قش مبرد معقم بموزع دقيق. باستخدام الموزع الدقيق ، املأ القشة بالوسائط المرغوبة إلى المستوى المناسب. بعد ذلك ، استنشق فقاعة هواء ، متبوعة بحجم ضئيل من محلول التزجيج المحتوي على الجنين ، وفقاعة هواء أخرى.
قم بشفط الوسائط مرة أخرى حتى يبلل الجزء الأول من الوسائط وبلمر سدادة القطن المطلية بالمسحوق ، مما يؤدي إلى إغلاق نهاية القش. أغلق الطرف الآخر بسدادة قش كارهة للماء. تساعد قطاعات الهواء والوسائط في عزل الأجنة داخل الناقل المغلق.
اغمر القش لفترة وجيزة في النيتروجين السائل عند -196 درجة مئوية. يضمن الناقل معدلات تبريد عالية ،
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية