ذوبان أجنة الأرانب: إجراء تسخين لاستعادة أجنة الأرانب المحفوظة بالتبريد لنقل الأجنة

ذوبان الأجنة هو عملية يتم فيها تسخين الأجنة المجمدة المحفوظة بالتبريد وترطيبها ، واستعادة نشاطها البيولوجي.

لإذابة أجنة الأرانب المحفوظة بالتبريد في قش مبرد محكم الغلق ، قم بإزالة القش من النيتروجين السائل. يتم عزل الأجنة ، ذات الحجم الأدنى من الوسائط المحتوية على مادة التبريد ، جسديا بواسطة أجزاء الهواء والوسائط داخل القش. ضع القش لفترة وجيزة في الهواء ، مما يسهل إطلاق أبخرة النيتروجين السائلة المحبوسة ، والتي تسبب تلف الجنين أثناء التعرض لدرجات حرارة أكثر دفئا.

يؤدي الارتفاع السريع من درجات حرارة النيتروجين السائل المبرد إلى درجات حرارة التجمد المرتفعة إلى تكوين بلورات الجليد داخل القش المبرد ، مما يخاطر بتلف الأجنة. عندما تبدأ بلورات الثلج في التكون ، اغمر القشة على الفور في حمام مائي يتم التحكم في درجة حرارته مع تحريك لطيف للذوبان المتساوي. تزيل هذه الخطوة بلورات الثلج ، وتحمي الأجنة من تلف بلورات الثلج.

قم بإزالة سدادة القش. قطع نهاية القش المختومة. قم بتوصيل موزع دقيق لتحرير المحتويات في صفيحة مزرعة بوسائط تحتوي على السكروز. تساعد الوسائط على إزالة المواد الواقية من الأجنة. يتجنب السكروز التورم المفرط للأجنة ، ويعيد بيئتها الفسيولوجية أثناء الجفاف.

انقل الأجنة إلى صفيحة جديدة تحتوي على وسائط لإزالة المواد المجمدة بالتبريد تماما ، مما يضمن إعادة الجفاف الكامل. الأجنة المذابة جاهزة لإجراءات نقل الأجنة.

لإذابة الأجنة لنقلها ، ضع القش الصغير أفقيا ، على بعد 10 سم من بخار النيتروجين السائل لمدة 20 إلى 30 ثانية. عندما تبدأ عملية التبلور داخل القش الصغير ، اغمر القش في حمام مائي بدرجة حرارة 25 درجة مئوية لمدة 10 إلى 15 ثانية. قم بإزالة القش وسدادات القطن على الفور ، واستخدم موزعا صغيرا مقترنا لطرد محتويات القش الصغير إلى صفيحة تحتوي على وسط أساسي 25 درجة مئوية مكمل بمحلول سكروز 0.33 مولار حيث يجب أن تبقى الأجنة لمدة 5 دقائق. بعد ذلك ، انقل الأجنة إلى طبق من الوسط الأساسي الطازج لمدة 5 دقائق أخرى.