الحقن المجهري للخلايا الروبوتية الموجهة بالصور: تقنية آلية عالية الإنتاجية للتوصيل الدقيق للسكاريد المصنف بالفلورسنت إلى خلايا عصبية مفردة في مزارع شرائح الدماغ العضوية

لإجراء الحقن المجهري للخلايا الروبوتية ، ابدأ بتحميل محلول عديد السكاريد المتوافق حيويا المبرد والملصق بالفلورسنت في إبرة حقن دقيقة محسنة. قم بتركيب الإبرة المحملة على حامل معالج دقيق قابل للبرمجة لتحديد موضع الإبرة بدقة أثناء الحقن المجهري.

انقل طبق مزرعة يحتوي على شرائح أنسجة المخ العضوية الجنينية للفأر في وسائط على مرحلة مجهر ساخن للحفاظ على الظروف الفسيولوجية للأنسجة. ركز على السطح القاعدي لشريحة أنسجة المخ ، والتي تتكون من خلايا عصبية هرمية ، واغمر الإبرة في الوسائط لوضعها بالقرب من الخلايا العصبية المراد حقنها بشكل دقيق.

اضبط ضغط التعويض لمنع ارتجاع الوسائط إلى الإبرة عن طريق العمل الشعري.

باستخدام البرنامج ، حدد المسار وزاوية الإبرة. ضع الإبرة عند نقطة البداية للمسار المعين وابدأ تشغيل الحقن المجهري الآلي.

تقطع الإبرة مسافة محددة نحو الخلية المستهدفة. تتسبب القوة المطبقة في ضغط الإبرة على غشاء الخلية ، مما يؤدي إلى زيادة التوتر الموضعي ، وتمزق طبقة ثنائية الفوسفوليبيد ، مما يسمح بالاختراق. عند الوصول إلى الحجرة السيتوبلازمية ، توزع الإبرة - وفقا لضغط الحقن المحدد - حجما خاضعا للرقابة من المحلول المحمل. بعد الحقن ، تتراجع الإبرة.

يثير الانثقاب في غشاء الخلية استجابة إصلاح خلوية جوهرية لاستعادة توازن الغشاء. يعاد إغلاق غشاء الخلية بأقل قدر من الضرر للخلايا العصبية ، مما يؤدي إ