التحول الجيني بوساطة Agrobacterium: طريقة لتحويل جينوم الأرز وراثيا عن طريق Agrobacterium tumefaciens المعدلة وراثيا
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:01 دقيقة • July 8th, 2025
هندسة Agrobacterium tumefaciens ، وهي بكتيريا نباتية مسببة للأمراض ، وراثيا عن طريق إدخال بلازميد Ti معد صناعيا ، يحمل جينا ذا أهمية في الحمض النووي أو منطقة T-DNA المنقول ، وبلازميد مساعد يحمل جينات الفوعة أو Vir لنقل T-DNA إلى الخلايا النباتية.
للتحول الجيني بوساطة Agrobacterium ، ابدأ بإزهار أرز صغير وقم بتقطيعه إلى قطع صغيرة. انقل القصاصات إلى وسط نمو واحتضانها لتسهيل نمو القصاصات إلى كتلة خلوية غير متمايزة تسمى الكالو.
الآن ، انقل الكالس إلى وسط تسلل Agrobacterium يحتوي على acetosyringone - وهو عامل جذب كيميائي ل Agrobacterium. بعد ذلك ، أضف ثقافة Agrobacterium المعدلة وراثيا إلى الوسط واحتضانها لفترة وجيزة.
تنشط جزيئات الأسيتوسيرينجون بروتين مستقبلات الخلية - VirA - على غشاء Agrobacterium ، والذي يتوسط بشكل أكبر في فسفرة بروتين منشط النسخ - VirG. يتحرك VirG الفسفوري نحو البلازميد المساعد وينشط نسخ سلسلة من جينات الفوعة ، بما في ذلك بروتينات القناة ونوكليازات داخلية - VirD1 و VirD2.
تشكل بروتينات القناة قناة نقل تربط الخلية البكتيرية والنباتية ، بينما ترتبط نوكليازات داخلية بالتسلسلات الحدودية في بلازميد Ti وتشق T-DNA مع VirD2 ، مرتبطة في أحد طرفيها. بعد ذلك ، يوجه VirD2 دخول T-DNA عبر قناة النقل إلى خلايا الكالس ويسهل اندماجه في جينوم الأرز.
امسح كل نورة بقطعة كحول بنسبة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية