توصيل الجينات الفيروسية العدسية بمساعدة الليزر: تقنية لاختراق البويضات المخصبة للفأر لتسهيل توصيل الجينات الفيروسية العدسية

توصيل الجينات الفيروسية بمساعدة الليزر هو تقنية لنقل الجينات المعدلة وراثيا إلى نظام مضيف.

لإنتاج الفئران المعدلة وراثيا ، ابدأ ببيض مخصب معزول للفأر في وسط استزراع مناسب. ضع طبق المزرعة المخصب المحتوي على البيض على مرحلة المجهر المثبت مسبقا بجهاز ليزر ومتصل ببرنامج تحكم. راقب في التكبير المناسب.

البويضات المخصبة محاطة بالمنطقة الشفافة ، وهي طبقة واقية من البروتين السكري تحيق جزيئات الفيروسات العبقية. لاختراق هذا الحاجز ، قم بتشغيل جهاز الليزر وتأكد من أن مؤشر LED لليزر مرئي فوق المنطقة الشفافة. باستخدام برنامج التحكم ، أطلق الليزر. اضبط مدة إطلاق النار وفقا لقطر الثقب المطلوب.

ضع البيض في حاضنة للتعافي. بعد حضانة قصيرة ، قم بإزالة البويضات وإضافة جزيئات الفيروس العدسي التي تحمل الجين محل الاهتمام وعلامة الفلورسنت القابلة للتحديد.

مع ثقب

المنطقة الشفافة ، ينتشر الفيروس العدسي بسهولة نحو غشاء خلية البويضة ويدخل عن طريق الالتقام الخلوي. يتفكك الفيروس العدسي ، ويطلق الحمض النووي الريبي الخاص به ، والذي ، عند معالجته بالتتابع في حمض نووي مزدوج الشريطة ، يدخل النواة المضيفة ، ويدمج الجينات الغريبة في جينوم المضيف.

احتضان البيض والسماح له بالتطور إلى كيسات أريمية. زرع الأكياس الأريمية في إناث الفئران المتزاوجة. بمجرد اكتمال الحمل ، استرجع الجراء وقم بتحليلها بحثا عن وجود الجينات المعدلة