نقل الجينات بوساطة بيولوجية: تقنية لتوصيل الجين ذي الأهمية في الخلايا المستهدفة عبر مسدس جيني بيولوجي

ابدأ بالحجم الأمثل من حبات الذهب - مركبات توصيل الجينات الخاملة بيولوجيا وغير السامة - في أنبوب الطرد المركزي الدقيق. ثم أضف العوامل الموجبة - سبيرميدين وكلوريد الكالسيوم ، متبوعة بشظايا الحمض النووي المرغوبة إلى حبات الذهب. نفض الغبار برفق على الأنبوب واحتضانه.

يرتبط كلوريد الكالسيوم بشظايا الحمض النووي ويسهل طلاءها على حبات الذهب عبر بقايا سبيرميدين. بعد ذلك ، جهاز الطرد المركزي وإزالة المذيب. أعد تعليق الخرز المطلي بالحمض النووي في الإيثانول. قم بتقطيع الخرزات برفق على قرص حامل كبير معقم. دعها تجف.

قم بإعداد جهاز مسدس جيني بيولوجي يتألف من أنبوب تسريع غاز الهيليوم وغرفة قصف مع قرص تمزق وشاشة توقف في الفتحات الخاصة بهما. بعد ذلك ، قم بعكس قرص الناقل الكبير وتحميله أسفل قرص التمزق.

بعد ذلك ، ضع الخلايا المضيفة المستهدفة المستزرعة في وسط صلب مناسب مكمل بالسوربيتول - مثبت تناضحي لتحسين كفاءة التحول. بمجرد أن يصبح الإعداد جاهزا ، أطلق مسدس الجينات.

عندما ينتقل الهيليوم إلى أسفل أنبوب التسارع ، يستمر الضغط في التراكم حتى ينكسر قرص التمزق ، مما يؤدي إلى موجات صدمة الهيليوم. تدفع موجات الصدمة هذه قرص الناقل الكبير الذي يحمل حبات ذهبية نحو شاشة التوقف ، مما يسمح فقط للحبات الذهبية بالمرور.

تخترق الخرزات الذهبية المتسارعة نواة الخلية المضيفة ، وتدمج الحمض النووي المطلوب في جينوم الخلية ال