موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:14 دقيقة • July 8th, 2025
بالنسبة للتلطيخ الخاص بالسيتوبلازم في البيئات الدقيقة للأنسجة الرخوة ، احصل على كلية فأر محصودة حديثا. عالجها بمحلول مثبت يحتوي على الفورمالديهايد وحمض الخليك الجليدي والميثانول. احتضان في درجات حرارة منخفضة.
يخترق الفورمالديهايد الخلايا ، ويربط البروتينات بالبروتينات والبروتينات بالأحماض النووية. يزيح الميثانول الماء من الأنسجة ويتخثر البروتينات. يسبب حمض الخليك التحمض داخل الخلايا وتورم الأنسجة ، وبالتالي يقاوم انكماش الأنسجة الناجم عن الميثانول.
يعملالتثبيت على تعطيل الإنزيمات واستقرار مورفولوجيا الأنسجة للتلوين اللاحق. قم بإزالة المثبتات الزائدة باستخدام المخزن المؤقت. احتضان الأنسجة باستخدام اليوزين Y ، وهي صبغة حمضية.
يخترق الإيوسين الخلايا الثابتة ويدخل السيتوبلازم. تتسبب البيئة الحمضية للسيتوبلازم ، من معالجة حمض الخليك ، في أقصى قدر من البروتونات للمجموعات الأمينية للبروتينات السيتوبلازمية.
يتفاعل الإيوزين ، مع المجموعات الوظيفية سالبة الشحنة ، إلكتروستاتيكيا مع مجموعات البروتونات البروتونية ، مكونا مركبا مستقرا للصبغة البروتينية ، ويلطخ السيتوبلازم باللون الوردي عند التراكم. بعد الحضانة ، قم بتقطيع الكلى الملطخة إلى قطع صغيرة ، متبوعة بجفاف الأنسجة في زيادة تركيزات الإيثانول.
قم بتضمين أنسجة الكلى في شمع البارافين. احصل على أقسام رقيقة من الأنسجة باستخدام ميكروتوم. علاوة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية