موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:33 دقيقة • July 8th, 2025
أثناء ورم خبيث للسرطان ، تنتقل الخلايا السرطانية من الورم الأولي عبر الدورة الدموية ، وتتسرب إلى الأعضاء البعيدة ، وتؤسس أورام ثانوية.
لتقييم ورم خبيث في الرئة في نموذج فأر سرطان الثدي الذي تم حقنه بخلايا 4T1 ، وخلايا سرطان الثدي شديدة النقيلية ، قم بإعداد تعليق خلوي ، بما في ذلك خلايا 4T1 ، معزولة من الرئتين المحصودة. الطرد المركزي التعليق وإعادة تعليق الخلايا في الوسائط التي تحتوي على 6-thioguanine ، 6-TG - نظير الجوانين. بذر معلق الخلية في لوحة ثقافة.
يدخل 6TG إلى الخلايا الطبيعية حيث يقوم إنزيم ترانسفيراز معين بتحويله إلى نيوكليوتيدات 6-TG ، وهي نيوكليوتيدات سامة. يتم دمج هذه النيوكليوتيدات السامة للخلايا في الحمض النووي ، مما يتسبب في تلف الحمض النووي ، والقضاء بشكل انتقائي على الخلايا من المزرعة. قللت خلايا 4T1 من قدرتها على تكوين نيوكليوتيدات سامة ، مما يسهل بقائها على قيد الحياة والتمسك باللوحة. اعتمادا على قدرة الخلايا على التكاثر ، فإنها تشكل مستعمرات.
عالج الخلايا بالميثانول. يتخلل الميثانول الخلايا ويفسد البروتينات الخلوية. احتضان الخلايا بالميثيلين الأزرق.
تدخلالصبغة موجبة الشحنة إلى الخلية ، وتتفاعل مع الحمض النووي سالب الشحنة ، وتداخل في الفراغات بين أزواج القواعد المجاورة لخيوط الحمض النووي. كما أنه يرتبط بالحمض النووي الريبي في السيتوبلازم ، ولكن مع تقارب أقل. تلط
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية