موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:40 دقيقة • July 8th, 2025
أثناء نقص تروية الدماغ، يؤدي ضعف تدفق الدم إلى الدماغ إلى تقليل إمداد الأكسجين والمغذيات إلى الأنسجة، مما يتسبب في تلف الدماغ. بعد نقص تروية قصير ، مع استعادة تدفق الدم إلى الدماغ ، يؤدي إعادة التروية مع زيادة إمدادات الأكسجين إلى فرط إنتاج أنواع الأيونات التفاعلية ، مما يؤدي إلى تلف الأنسجة المؤكسدة ، المعروف باسم إصابة نقص التروية وإعادة التروية.
لتقييم تلف الدماغ بعد إصابة نقص التروية وإعادة التروية في نموذج الفئران ، أولا ، حصاد دماغ الفئران. اشطفها في محلول عازل مبرد لإزالة الحطام والدم. قسم الدماغ للحصول على شرائح إكليلية بالسماكة المرغوبة. انقل الشرائح بحذر إلى صينية تحتوي على عازلة - بحيث تكون الأسطح الأمامية متجهة لأعلى - للتلوين اللاحق.
أضف محلول كلوريد تريفينيل تيترازوليوم الدافئ ، TTC ، صبغة الأكسدة والاختزال القابلة للذوبان في الماء ، على شرائح الدماغ. احتضن في ظل الظروف المظلمة ، حيث أن TTC حساس للضوء. يدخل TTC الخلايا داخل قسم الأنسجة.
في الخلايا الحية ، يقلل إنزيم نازعة هيدروجين السكسينات النشط في الميتوكوندريا في وجود عوامل مساعدة من TTC ، عديم اللون عند الأكسدة ، إلى فورميزان أحمر غير قابل للذوبان في الماء ، مما يؤدي إلى تلطيخ الخلايا القابلة للحياة باللون الأحمر الغامق. ومع ذلك ، تفتقر الخلايا الميتة إلى نشاط نازعة الهيدروجين. وبالتالي ، يظل TTC في شكل مؤكسد ، مم
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية