JoVE Encyclopedia of Experiments
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدات • 2:50 د • July 8th, 2025
تتكون ظهارة قناة فالوب من خلايا إفرازية تنتج سائلا غنيا بالمغذيات وخلايا مهدبة تدفع البويضة المغمورة بالسوائل نحو الرحم. ترتبط التغيرات المورفولوجية والفقدان الوظيفي في الخلايا البوقية بسرطان قناة فالوب.
لتصور مورفولوجيا البوق ، خذ شريحة ملطخة بالأنسجة واغمسها في الإيثانول لإصلاح خصائصها الخلوية. اشطف الشريحة بالماء لإزالة المثبت الزائد.
الآن ، اغمس الشريحة في الهيماتوكسيلين ، وهي صبغة كاتيونية تربط الحمض النووي سالب الشحنة ، وتلطخ النواة باللون الأزرق. اشطف الشريحة بالماء متبوعا بالإيثانول لمنع الإفراط في التلطيخ.
بعد ذلك ، اغمر الشريحة في صبغة Eosin Azure - محلول متعدد الألوان من Bismarck brown و Eosin Y و Fast Green ممزوج بحمض الفوسفوتونغستيك. يترسب بسمارك براون حمض الفوسفوتونغستيك ، وهو مادة لاذعة يستخدمها Eosin Y ، والأخضر السريع لتلطيخ الخلايا البوبية غير السرطانية والخلايا السرطانية النشطة تمثيلا غذائيا.
كرر خطوة شطف الماء والكحول. أخيرا ، اغمر الشريحة في الزيلين - عامل إزالة يزيل مكونات البقعة الزائدة. بعد ذلك ، قم بتركيب الشريحة وتصورها تحت المجهر.
تظهر ظهارة قناة فالوب الطبيعية كطبقة منظمة من الخلايا الملطخة باللون الأزرق الفاتح والهدبية والإفرازية. في المقابل ، تظهر الخلايا الخبيثة في الظهارة على شكل مجموعات خلايا ذات نوى داكنة.
قبل تلطيخ الخلايا ، قم بتحميل قارورة العينة في معالج آلي لإعداد الشريحة. عندما تكون الشرائح جاهزة ، اغمس العينات في 95٪ من الإيثانول ، 10 مرات ، لمدة ثانية واحدة لكل غطس ، متبوعة ب 10 غموسات في الماء ، لمدة ثانية واحدة لكل غطس.
بعد ذلك ، اغمر الشرائح في الهيماتوكسيلين لمدة 10 إلى 60 ثانية ، متبوعا بغسل ثان بالماء والإيثانول. بعد غمر الإيثانول الأخير ، اغمر الشرائح في Eosin Azure لمدة 1 إلى 3 دقائق ، متبوعا بشطف آخر من الإيثانول المائي. ثم اغمس الشرائح في الزيلين. حتى تصبح العينات واضحة.