موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 2:30 دقيقة • July 8th, 2025
في النباتات ، عادة ما يتم ترسيب اللجنين - وهو بوليمر حيوي معقد - في جدران خلايا الأنسجة لتوفير الدعم.
يوجد التقشير في الغالب في سماكة جدار الخلية الثانوية لخلايا نسيج الخشب الموصلة للماء ، مثل الأوعية والألياف ، والخلايا خارج الخفاف ، مثل الألياف بين اللفافات.
من الناحية الهيكلية ، يتكون اللجنين من سلائف أحادية التشابك. تتبلمر هذه الكحوليات العطرية ، وتشكل بنية متفرعة للغاية. هذه الميزة تعزز قوة النبات وصلابته.
لتصور ترسب اللجنين باستخدام تلطيخ ويزنر ، خذ المقاطع العرضية لجذع ثنائي الفلقة المضمنة في الاغاروز المشتقة من الجزء الأوسط أو السفلي من النبات. أضفها إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق الذي يحتوي على مخزن مؤقت مناسب.
أضف محلول البقع المحضر ، الذي يحتوي على الفلوروجلوسينول والإيثانول المحمض ، إلى أقسام الساق. تتفاعل الكحوليات الموجودة في اللجنين مع الفلوروغلوسينول والإيثانول لإنتاج صبغة وردية. ينتج عن هذا تطور اللون الوردي المقابل لترسب اللجنين في جدران الخلايا المتخصصة.
الآن ، انقل القسم الملون إلى شريحة مجهرية. ضع غطاء برفق فوق القسم ، وتجنب الفقاعات ، للمساعدة في تصوره بشكل أفضل. تصور الأقسام تحت المجهر الضوئي.
يؤكداللون الوردي في خلايا نسيج الخشب المتخصصة والألياف بين اللفافات في المقاطع العرضية للساق وجود اللجنين في هذه الأنسجة.
لتلوين الفلوروجلوسينول ، انقل أقسام الساق إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق. أضف 1 ملليلتر من محلول الفلوروغلوسينول إلى الأنبوب ، وقم بتغطيته على الفور لأن حمض الهيدروكلوريك الموجود في صبغة الفلوروغلوسينول شديد التآكل. حرك الأنبوب برفق للتأكد من تلطيخ جميع الأقسم. ضع الماصة برفق في طرف ماصة مقطوع وعلى شريحة مجهرية. قم بتغطية الأقسام بغطاء راقب الأقسام الموجودة تحت إضاءة المجال الساطع. يجف المحلول في غضون 5 إلى 10 دقائق مما يتسبب في تدهور العينات ، لذلك يجب إكمال التصوير خلال تلك الفترة الزمنية.