JoVE Encyclopedia of Experiments
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدات • 2:44 د • July 8th, 2025
اللجنين هو مكون هيكلي مهم في جدار الخلية النباتية. إنه بوليمر يتكون بشكل أساسي من كحول الحقن ، أو وحدات S-lignin ، وكحول guaiacyl ، أو وحدات G-lignin ، ومجموعة صغيرة من الكحوليات شبه الكوماريل تسمى وحدات H-lignin.
يختلف محتوى S-lignin في الأنسجة النباتية الثانوية المختلفة. توجد بشكل أساسي في الأوعية والألياف الخشبية والألياف بين اللفافات ، حيث توفر الدعم الهيكلي.
للكشف عن وجود S-lignin ، خذ المقاطع العرضية لجذع ثنائي الفلقة المضمنة في الأنبوب. عالج أقسام الساق بالتتابع بمحلول تلطيخ برمنجنات البوتاسيوم ، متبوعا بحمض الهيدروكلوريك المخفف ، وأخيرا باستخدام هيدروكسيد الأمونيوم - قاعدة ضعيفة.
خلال هذا العلاج ، يخضع جزء S-Lignin الموجود في جدار الخلية لسلسلة من التغييرات لتوليد منتج يظهر باللون الأحمر.
تكونشدة اللون الأحمر أقل في خلايا نسيج الخشب بسبب وجود عدد أقل من S-lignin مقارنة بالألياف بين اللافتات ، والتي تظهر باللون الأحمر العميق. انقل الأقسام إلى شريحة ، وتصورها تحت المجهر الضوئي.
يساعد التباين في شدة اللون الأحمر على فهم النسبة النسبية ل S-lignin في الأنسجة النباتية الخشنة.
بالنسبة لتلوين Maule ، انقل أقسام الساق إلى أنبوب طرد مركزي دقيق. أضف 1 مليلتر من محلول برمنجنات البوتاسيوم 0.5٪ إلى الأنبوب الذي يحتوي على الأقسام. ماصة محلول برمنجنات البوتاسيوم 0.5٪ لأعلى ولأسفل برفق ، ويفضل أن يكون ذلك ، دون إزعاج الأقسام.
بعد حضانة لمدة دقيقتين وتكرار سحب العينة ، اترك أنبوب الطرد المركزي الدقيق يقف حتى تستقر جميع الأقسام. باستخدام ماصة سعة 1 ملليلتر، اسحب 700 ميكرولتر من محلول برمنجنات البوتاسيوم بنسبة 0.5٪. أضف 700 ميكرولتر من الماء المقطر لشطف برمنجنات البوتاسيوم. كرر ثلاث إلى أربع مرات أو حتى يظل محلول الماء صافيا.
بعد التخلص من الماء ، أضف بسرعة 1 ملليلتر من حمض الهيدروكلوريك بنسبة 3٪ حتى يتم تفريغ اللون البني الغامق من الأقسام. قد يحدث هذا في غضون 3 إلى 5 دقائق أو قد يتطلب غسلتين مدة كل منهما 5 دقائق. قم بإخراج كل محلول حمض الهيدروكلوريك بنسبة 3٪ وأضف على الفور 1 ملليلتر من محلول هيدروكسيد الأمونيوم المركز قبل التصوير تحت إضاءة المجال الساطع.
تناقش هذه المقالة أهمية اللجنين، وخاصة S-lignin، في الجدران الخلوية للنباتات ودوره في توفير الدعم الهيكلي. وتفصل المقالة طريقة صبغ لتصوير S-lignin في الأنسجة النباتية، مع تسليط الضوء على الاختلافات في كثافة الصبغ بين مختلف أنواع الخلايا.
يُعد التوصيف الكمي لتوزيع اللجنين في الأنسجة النباتية أمراً بالغ الأهمية لفرق الأدوية الحيوية التي تعمل على هندسة سمات الكتلة الحيوية أو تحسين خصائص المواد الخام. تتيح تقنية صبغ Maule التصور الدقيق لمواقع تجزؤ لجنين السيرينجيل (S-lignin)، مما يدعم الاكتشاف القائم على الفرضيات وتقليل المخاطر الآلية في مسارات البحث والتطوير القائمة على النباتات. وتوجه هذه القدرة عمليات التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة وفرز المحافظ لبرامج تحسين السمات.
يتكامل بروتوكول صبغ Maule ضمن مراحل الاكتشاف والمسح المبكرة لسير عمل هندسة سمات النبات، حيث يربط بين اختبار الفرضيات والتنميط الظاهري الكمي.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026