تلطيخ الكونغو الأحمر: تقنية لتصور رواسب السليلوز في أقسام جذع النبات

السليلوز عبارة عن بوليمر غير متفرع من وحدات الجلوكوز β مرتبطة بوصلة β-1→4 وترتيبها بالتوازي عبر روابط هيدروجينية بين الجزيئات.

يعمل السليلوز كمكون هيكلي رئيسي لجدار الخلية النباتية ، حيث يوفر الشكل والصلابة للخلايا ويسهل نمو النبات وتطوره. تختلف نسبة السليلوز داخل جدار الخلية بشكل كبير في جميع أنحاء النبات ، وفقا لنوع الخلية ومرحلة النمو.

لتصور ترسب السليلوز في الجذع ، خذ مقاطع عرضية رفيعة من أقسام الساق المضمنة في الاغاروز.

أضف صبغة الفلورسنت الحمراء الكونغو واحتضان الأقسام.

تدخل جزيئات الكونغو الحمراء إلى جدار الخلية وتشكل روابط هيدروجينية مع مجموعات الهيدروكسيل في السليلوز ، وبالتالي يتم امتصاصها على البوليمر. هذا يضفي لونا أحمر على البشرة والقشرة واللب.

تنتشر جزيئات الصبغة أيضا داخل جدران الخلايا المعقدة لنسيج الخشب والألياف بين اللفافات ، وتعبر حاجز اللجنين الصلب ، وبالتالي تضفي لونا أحمر على هذه الأنسجة أيضا.

الآن ، اشطف الأقسام بالماء لإزالة البقع الزائدة. انقل الأقسام إلى شريحة مجهرية وضع غطاء.

عند تصورها تحت المجهر الفلوري ، تظهر البشرة والقشرة واللب المركزي ونسيج الخشب والألياف بين اللفافات باللون الأحمر ، بما يتوافق مع محتواها من السليلوز.

بالنسبة لتلطيخ الكونغو الأحمر ، انقل أقسام الجذع إلى أنبوب طرد مركزي دقيق ، وأضف 1 مليلتر من محلول الكونغو الأحمر 0.5٪. قم بتقطيع محلول الكونغو الأحمر بنسبة 0.5٪ برفق لأعلى ولأسفل، دون إزعاج الأقسام، قبل احتضان الأقسام وغسلها كما هو موضح في بروتوكول النص. قم بوضع الماصة برفق في طرف ماصة مقطوعة، وعلى شريحة مجهرية، ثم قم بتغطيتها بغطاء غطاء. راقب العينات الموجودة على المنزلق في المجهر تحت إثارة الضوء الأزرق باستخدام مرشح انبعاث 560 نانومتر.