الفصل القائم على كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة لمتغيرات حمض الميكوليك: طريقة لفصل دهون جدار الخلايا الفطرية بناء على القطبية

0 views • 3:26 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
يحتوي

جدار الخلية الفطرية على أنواع مختلفة من الأحماض الفطرية - الأحماض الدهنية طويلة السلسلة مع سلاسل ألفا المحفوظة. توجد اختلافات هيكلية في سلاسل بيتا الخاصة بهم ، مما يؤدي إلى اختلافات في قطبية الأحماض الفطرية المختلفة.

لفصل المتغيرات باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة ، أو TLC - تقنية كروماتوغرافيا سائلة - خذ دهون جدار الخلية الفطرية في المذيب العضوي المطلوب. بقعة الدهون بالقرب من قاعدة لوحة TLC المطلية مسبقا بطبقة رقيقة من المواد الماصة ، والتي تعمل كمرحلة ثابتة.

ضع اللوحة داخل وعاء يحتوي على مذيب عضوي - المرحلة المتحركة - مع التأكد من أن مستوى السائل أقل من بقع العينة لمنع الانتشار المبكر للأحماض

الفطرية.

أثناء الجري ، ترتفع المرحلة المتحركة من خلال المسام الصغيرة للطبقة الماصة على اللوحة عن طريق العمل الشعري. في النهاية ، تذوب الأحماض الفطرية في المذيب وتنتقل لأعلى.

يتم امتصاص المزيد من متغيرات حمض الفطريات القطبية بشكل عابر بواسطة المرحلة القطبية الثابتة عبر القوى بين الجزيئات ، مما يعيق حركتها الصاعدة. تبقى الأحماض الفطرية القطبية الأقل في المرحلة المتنقلة غير القطبية وتهاجر أكثر.

تؤدي الاختلافات في الهجرة إلى انفصال متغيرات حمض المكوليك إلى نطاقات منفصلة.

عند الانتهاء ، رش الطبق المجفف ببقعة حمض الفوسفوروموليبديك. قم بتسخين اللوحة لتقليل البقعة في وجود الدهون ، مما يضفي لونا أخضر داكنا على العصابات.

لتحليل العينات بواسطة TLC ، قم بتغطية أحد جدران غرفة TLC بقطعة من ورق الترشيح. أضف الفازلين على زوايا الغرفة لإغلاق الغرفة. صب خليط المذيبات فوق ورق الترشيح ، وأضف الحجم المتبقي من المذيب إلى قاع غرفة TLC. أغلق غرفة TLC لمدة 20 دقيقة على الأقل لتشبعها

وفي الوقت نفسه ، قم بإذابة الدهون في الأنبوب الزجاجي في 200 إلى 1,000 ميكرولتر من الكلوروفورم ، واستخدم أنبوبا زجاجيا شعريا لتطبيق 10 ميكرولتر من معلق الكلوروفورم الدهني مباشرة على لوحة TLC. بعد ترك العينة تجف لمدة خمس دقائق ، أدخل اللوحة في غرفة TLC المشبعة ، واترك المرحلة المتنقلة تمر عبر TLC.

عندما يصل المذيب إلى 1 سم من الطرف العلوي للوحة ، ضع اللوحة تحت التدفق الرقائقي حتى تجف السيليكا تماما. بعد ذلك ، رش الصفيحة المجففة ب 15 إلى 20 مل من هيدرات حمض الموليبداتوفوسفوريك بنسبة 10٪ في الإيثانول ، حتى تصبح الصفيحة صفراء زاهية ، وقم بتسخين اللوحة لمدة دقيقتين إلى خمس دقائق عند 120 درجة مئوية.

06:30

استخدام الميكروتيدر طبق الوسم الإشعاعي لقياسات متعددة في الجسم من الإشريكية القولونية (ع) ppGpp تليها طبقة رقيقة اللوني

Related Videos

0 Views

08:30

تحليل توليف الدهون المحايدة في Saccharomyces cerevisiae بواسطة وضع العلامات الأيضية وكروماتوغرافيا طبقة رقيقة

Related Videos

0 Views

14:59

تحديد مجموع الدهون والدهون الطبقات في العينات البحرية

Related Videos

0 Views

09:26

الخلوية لاستخراج الدهن المستهدفة التخفيف النظائر المستقرة تحليل السائل الطيف اللوني القداس

Related Videos

0 Views

12:57

عزل وتوصيف المواد الكيميائية من الدهن من البكتيريا سالبة الجرام

Related Videos

0 Views

11:18

عزل وإعداد جدران الخلايا البكتيرية للتحليل التركيبي بواسطة الترا الأداء الكروماتوغرافيا السائلة

Related Videos

0 Views

08:59

تحديد الركيزة الخصوصيات لالليباز وفسفوليباز المرشحين

Related Videos

0 Views

07:55

العزل الكيميائية والتقدير الكمي، وفصل الدهون الجلد من الزواحف

Related Videos

0 Views

08:56

التحليل الكمي للدهون الخلوية من Saccharomyces Cerevisiae باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة إلى جانب قياس الطيف الكتلي جنبا إلى جنب

Related Videos

0 Views

07:42

تحليل تكوين الدهون من البكتيريا الفطرية من قبل طبقة رقيقة الكروماتوغرافيا

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026