الكروماتوغرافيا السائلة للتفاعل الكارهة للماء المعتمدة على البوتيل: تقنية لتوصيف اقترانات الأجسام المضادة والأدوية بناء على التفاعلات الكارهة للماء

تتشكل متقارنات الأجسام المضادة للأدوية - ADCs - عن طريق ربط جسم مضاد أحادي النسيلة محدد بالعقاقير السامة للخلايا عبر روابط مناسبة. تخلق عملية الاقتران العشوائي ADCs بأعداد مختلفة من شقوق المخدرات.

تتميز أنواع ADC بنسبة الدواء إلى الأجسام المضادة أو DAR ، والتي تحدد فعاليتها العلاجية. الكراهية للماء من ADCs يجعلها مرشحة مناسبة للتفاعل الكارهة للماء الكروماتوغرافيا السائلة أو التوصيف القائم على التحالف الدولي للموئل.

للبدء ، قم بتجميع عمود كروماتوغرافيا يحتوي على مرحلة ثابتة قائمة على مصفوفة الاغاروز. ترتبط المصفوفة بشقوق البوتيل - المجموعات الوظيفية الألكيل الكارهة للماء. موازنة العمود بمخزن مؤقت عالي لربط الملح. اتبعه عن طريق تحميل حل ADC على العمود.

تعمل

أيونات الملح الموجودة في المخزن المؤقت على إزاحة جزيئات الماء حول ADCs ، مما يعرض مناطقها الكارهة للماء. يتيح ذلك ل ADCs الارتباط بروابط البوتيل عبر التفاعلات الكارهة للماء. تظهر ADCs التي تحتوي على عدد أكبر من شقوق الأدوية المرتبطة تفاعلا أقوى مع العمود.

استبدل المخزن المؤقت عالي الملح ببطء بمحلول الشطف الذي يحتوي على تركيز منخفض من الملح. تسمى عملية التقليل التدريجي لتركيز الملح بشطف التدرج.

يؤدي الانخفاض في أيونات الملح إلى إعادة تمكين جزيئات الماء من إحاطة ADCs ، مما يعطل تفاعلها مع الروابط. يتم استخلاص ADCs التي تحتوي على أقل