موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:15 دقيقة • July 8th, 2025
الجليكوزامينوجليكان المكبريت مثل كبريتات الهيباران ، HSs ، هي عديد السكاريد سالب الشحنة ، خطي ، كبريتات ذات أطوال سلسلة متغيرة ، متصلة ببروتينات سطح الخلية.
لتقدير HSs ذات الطول المختلف المعزولة من أنسجة رئة الفئران ، ابدأ بتجميع كاسيت الجل. املأه جزئيا بمحلول أكريلاميد ثنائي الساكريلاميد عالي التركيز ، بما في ذلك عوامل التحفيز - بيرسلفات الأمونيوم ورترا ميثيل إيثيلين ديامين. تراكب بالماء لمنع ملامسة الهواء ، مما قد يمنع البلمرة. حضن.
تعمل عوامل التحفيز على بلمرة الأكريلاميد والبيساكريلاميد ، وتشكيل جل لحل المسام الصغيرة. تخلص من الماء. أضف تركيزا منخفضا من محلول الأكريلاميد ثنائي الساكريلاميد مع عوامل التحفيز. أدخل مشط هلام لإنشاء آبار. يتبلمر المحلول ، ويشكل جل تكديس كبير المسام.
قم بتحميل غرف خزان الرحلان الكهربائي بعازل تشغيل للحصول على الموصلية الكهربائية المثلى أثناء الرحلان الكهربائي.
قم بإذابة خليط HS في مخزن التحميل الذي يحتوي على صبغة التتبع والسكروز. بعد ذلك ، انقل هذا الخليط وسلالم HS القياسية إلى آبار الكاسيت. يحصر السكروز الخليط على الآبار. تساعد الصبغة في مراقبة تطور الرحلان الكهربائي.
بدء الرحلان الكهربائي عند الجهد المنخفض. تعبر HSs سالبة الشحنة هلام التكديس ، وتتحرك نحو الأنود موجب الشحنة ، وتركز في واجهة هلام حل التكديس بسبب اختلاف حجم المسام.
زيادة الجهد. تهاجر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية