موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:34 دقيقة • July 8th, 2025
للبدء ، خذ عينة تحتوي على قليل نوكليوتيدات الحمض النووي الريبي الفسفرية وغير الفسفرية الممزوجة بصبغة التحميل التي تحتوي على اليوريا. تسخين العينة.
اليوريا - مادة مسحة قوية - بالاشتراك مع الحرارة تشوه بنية الحمض النووي الريبي الثانوية ، مما يؤدي إلى تشكلها الخطي وغير المنظم. الآن ، قم بصب الجل عن طريق خلط محلول الأكريلاميد وثنائي الساكريلاميد مع اليوريا.
أضف رباعي الميثيلين ديامين ، وهو محفز ، وبيرسلفات الأمونيوم ، وهو عامل مؤكسد ، لتسهيل بلمرة الهلام اللاحقة.
صب المحلول في جهاز كاسيت مجمع مسبقا. أدخل مشطا ، وقم بإنشاء آبار لتحميل العينات. دع الجل يتبلمر. ضع الكاسيت في جهاز الجل. أضف عازلة قيد التشغيل إلى الخزانات العلوية والسفلية ، مع الحفاظ على تدفق التيار عبر الجل بأكمله. قم بإزالة المشط.
قم بتحميل العينة الممزوجة بصبغة التصور في البئر وقم بتوصيل الجل بمصدر طاقة بالجهد المطلوب. تسمح اليوريا الموجودة في الجل لجزيئات الحمض النووي الريبي بالهجرة كأنواع خطية.
يعمل الجل كغربال ، مما يسمح لجزيئات الحمض النووي الريبي سالبة الشحنة بالتحرك عبر المسام باتجاه القطب الموجب. أثناء الجري ، يتحرك الحمض النووي الريبي الفسفوري بطبيعته أكثر سلبية بشكل أسرع من الحمض النووي الريبي غير الفسفري.
قم بتصوير الجل للكشف عن الحمض النووي الريبي المسمى بالفلورسنت. لاحظ تحول الحركة بين الحمض النووي الريبي الف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية