موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:41 دقيقة • July 8th, 2025
لتحليل أمبليكونات الحمض النووي - شظايا الحمض النووي المضخمة ذات الطول المحدد - الناتجة عن تفاعل البوليميراز المتسلسل متعدد الإرسال ، تفاعل البوليميراز المتسلسل ، باستخدام الرحلان الكهربائي لهلام الاغاروز ، قم بتجميع صينية صب بمشط لإنشاء آبار لتحميل العينات.
صب تركيزا مناسبا من الاغاروز المنصهر ، وهو عديد السكاريد الخطي ، المذاب في محلول الرحلان الكهربائي ، مع استكمال صبغة الحمض النووي الفلورية ، على صينية الصب واتركه يتصلب.
يتبلمر الاغاروز المنصهر ، ويشكل هلام ثلاثي الأبعاد مع مسام مجهرية.
ضع الجل المصبوب في خزان الرحلان الكهربائي ، مع توجيه جانب المشط بالقرب من الكاثود السالب. يحتوي الخزان على المخزن المؤقت للرحلان الكهربائي المستخدم في تحضير الهلام للحفاظ على الموصلية المثلى. قم بإزالة المشط.
انقل عينة منتج PCR ، الممزوجة بمحلول صبغة التحميل لمراقبة هجرة العينة ، إلى الآبار. قم بتحميل بئر واحد بسلالم الحمض النووي ذات الطول المحدد. بدء الرحلان الكهربائي.
تهاجر مضخمات الحمض النووي ، مع مجموعات الفوسفات السالبة المتباعدة بشكل متساو ، من الآبار إلى الجل باتجاه الأنود الموجب ويتم فصلها بناء على طولها بسبب الحركة العالية للأمبليكونات الأقصر من الأكبر حجما. في الوقت نفسه ، تهاجر صبغة الحمض النووي الفلورية الموجبة في الجل في الاتجاه العكسي وتتحد مع مضخمات الحمض النووي ، وتتداخل بين القوا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية