موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:29 دقيقة • July 8th, 2025
لتحديد حجم شظايا الحمض النووي باستخدام الرحلان الكهربائي الشعري ، ابدأ بأخذ لوحة فحص متعددة الآبار. يحتوي كل بئر على أمبليكون PCR ذات علامات فلورية ومختلفة الحجم - قليل النوكليوتيدات DNA مزدوجة الشريطة تم الحصول عليها بعد دورة PCR.
أضف عددا قليلا من شظايا الحمض النووي ذات الأحجام المختلفة ومزدوجة الشريطة إلى البئر ، والتي تعمل كمعيار للحجم. يحمل كل جزيء من جزيئات الحمض النووي علامة الفلورسنت لسهولة التعرف عليها.
استكمل البئر بالفورماميد ، وهو مادة مسحة قوية ، وقم بتسخينها على درجة حرارة عالية. تعمل هذه الخطوة على تغيير طبيعة الحمض النووي ، وتشكيل شظايا أحادية الشريطة يمكن أن تهاجر بسهولة عبر مسام الجل.
ضع اللوحة في وحدة محلل الشظايا التي تحتوي على هلام بوليمر محقون مسبقا داخل نظام الشعيرات الدموية.
قم بتطبيق جهد عال لإدخال الحمض النووي كهربائيا من البئر إلى الشعيرات الدموية ذات القطر الرقيق عند الكاثود - الطرف السالب. تهاجر جزيئات الحمض النووي سالبة الشحنة نحو الأنود موجب الشحنة. تواجه خيوط الحمض النووي الأقصر قوة احتكاك أقل وتتحرك بشكل أسرع عبر الجل من خيوط الحمض النووي الأطول.
أثناء الهجرة الكهربائية ، يعبر الحمض النووي مسار شعاع الليزر ، مما يؤدي إلى تألق الصبغة. يتم التقاط إشارات الانبعاث من الصبغة بواسطة كاشف ويتم ترجمتها لاحقا إلى مخطط كهربية - رسم بياني يمثل كل حمض نووي فلور
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية