الفحص اللوني القائم على سلفونات البثوفيانثرولين: طريقة بسيطة وسريعة لقياس كمية الحديد غير الهيم في أنسجة كبد الفأر

0 مشاهدات3:03 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في الأنسجة ، يوجد الحديد ، وهو معدن أساسي ضروري لعمليات التمثيل الغذائي المختلفة ، معزولا عن بروتينات الدم وبروتينات الحديد غير الهيم. تشتمل بروتينات الدم على الحديد الحديدي أو الحديد الهيم المرتبط بحلقات البورفيرين ، في حين أن بروتينات الحديد غير الهيم تفتقر إلى بنية حلقة البورفيرين وتتكون في الغالب من الحديد أو الحديد غير الهيم.

لتقدير محتوى الحديد غير الهيم في أنسجة كبد الفأر، عالج شظية من أنسجة كبد الفأر المجففة والمحصودة بتركيزات منخفضة من حمض الهيدروكلوريك وحمض ثلاثي كلورو أسيتيك. احتضان في درجات حرارة عالية لهضم الأنسجة وتسهيل ترسيب البروتين الناجم عن الحمض.

بسبب التركيزات الحمضية المنخفضة ، يتم إطلاق الحديد غير الهيم من البروتينات المرتبطة به. حديد الهيم ، المرتبط بحلقة البورفيرين ، لا يزال غير متأثر.

بعد التبريد ، انقل الحجم المطلوب من المادة الطافية التي تحتوي على حديد غير الهيم إلى صفيحة متعددة الآبار. أضف مخلب الحديد الكروموجينيك ، سلفونات الباثوفينانثرولين ، BPS ، المكمل بحمض الثيوغليكوليك ، عامل اختزال ، في مخزن مؤقت مناسب واحتضان.

يقلل

حمض الثيوجليكوليك من كل الحديد غير الهيم إلى الحديد الحديدي ، والذي يمكن أن يرتبط بسهولة ب BPS بنسبة 1: 3 ، مكونا مركبا عالي الاستقرار باللون الوردي. بالإضافة إلى ذلك ، يمنع حمض الثيوغليقوليك التداخل بسبب أي كاتيونات فلزية ثنائية التكافؤ ملوثة مثل النحاس قد تتفاعل مع BPS.

ضع اللوحة متعددة الآبار في قارئ صفيحة دقيقة لقياس امتصاص مجمعات BPS الحديدية الوردية ، والتي تمثل تركيز الحديد غير الهيم في جزء أنسجة كبد الفأر.

انقل كل قطعة مجففة من الأنسجة إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 ملليلتر. أضف 1 مليلتر من خليط الحمض إلى الأنبوب وأغلقه. قم بإعداد فارغ حمضي بنفس الطريقة ، باستثناء أن الأنسجة محذوفة هنا.

احتضان الأنابيب عند 65 درجة مئوية لمدة 20 ساعة لهضم الأنسجة.

بعد التبريد إلى درجة حرارة الغرفة، استخدم ماصة دقيقة مزودة بأطراف بلاستيكية لنقل 500 ميكرولتر من مستخلص الحمض الصافي إلى أنبوب طرد مركزي دقيق جديد سعة 1.5 ملليلتر.

قم بإعداد تفاعلات الكروموجين مباشرة في الصفائح الدقيقة المسطحة القاع ، 96 بئر ، الشفافة ، غير المعالجة ، البوليسترين. احتضنها في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة.

قم بقياس امتصاص العينة في قارئ الألواح بطول موجي يبلغ 535 نانومتر مقابل مرجع مائي منزوع الأيونات.

09:51

معايير التحليل الكمي Metalloproteomic عن طريق الحجم استبعاد ICP-MS

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:12

أسلوب قياس ألوان لقياس محتوى الحديد في النباتات

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:48

إعداد الترافيسيرات الشعرية -البلازما المقترنة الاستقرائي الطيف الطيفي (CE-ICP-MS) لقياس كمية من أنواع الأكسدة الحمراء الحديد (Fe(II), Fe(III))

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:43

قياس مستويات هيم في تخليق خلايا الثدييات

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:35

القياس الكمي للنض المعدني في الفصل اللوني لتقارب المعادن

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:45

تحديد كمية نقل الحديد عبر مشيمة الفأر في الجسم الحي باستخدام نظائر الحديد غير المشعة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:08

قياس محتوى الحديد غير الهيم في الأنسجة باستخدام فحص كولوريمتري قائم على الباثوفينانثرولين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:34

المقايسة الحيوية لخلايا Caco-2 لقياس التوافر البيولوجي للحديد الغذائي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:36

طريقة فلورسنت خالية من الخلايا قابلة للقياس الكمي وغير مكلفة لتأكيد قدرة المركبات الجديدة على تخمير الحديد

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:32

تقييم ترسب الحديد في أدمغة الفئران 5xFAD بواسطة تلطيخ Perls / DAB

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026