موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:03 دقيقة • July 8th, 2025
في الأنسجة ، يوجد الحديد ، وهو معدن أساسي ضروري لعمليات التمثيل الغذائي المختلفة ، معزولا عن بروتينات الدم وبروتينات الحديد غير الهيم. تشتمل بروتينات الدم على الحديد الحديدي أو الحديد الهيم المرتبط بحلقات البورفيرين ، في حين أن بروتينات الحديد غير الهيم تفتقر إلى بنية حلقة البورفيرين وتتكون في الغالب من الحديد أو الحديد غير الهيم.
لتقدير محتوى الحديد غير الهيم في أنسجة كبد الفأر، عالج شظية من أنسجة كبد الفأر المجففة والمحصودة بتركيزات منخفضة من حمض الهيدروكلوريك وحمض ثلاثي كلورو أسيتيك. احتضان في درجات حرارة عالية لهضم الأنسجة وتسهيل ترسيب البروتين الناجم عن الحمض.
بسبب التركيزات الحمضية المنخفضة ، يتم إطلاق الحديد غير الهيم من البروتينات المرتبطة به. حديد الهيم ، المرتبط بحلقة البورفيرين ، لا يزال غير متأثر.
بعد التبريد ، انقل الحجم المطلوب من المادة الطافية التي تحتوي على حديد غير الهيم إلى صفيحة متعددة الآبار. أضف مخلب الحديد الكروموجينيك ، سلفونات الباثوفينانثرولين ، BPS ، المكمل بحمض الثيوغليكوليك ، عامل اختزال ، في مخزن مؤقت مناسب واحتضان.
يقللحمض الثيوجليكوليك من كل الحديد غير الهيم إلى الحديد الحديدي ، والذي يمكن أن يرتبط بسهولة ب BPS بنسبة 1: 3 ، مكونا مركبا عالي الاستقرار باللون الوردي. بالإضافة إلى ذلك ، يمنع حمض الثيوغليقوليك التداخل بسبب أي كاتيونات فلزية ثنائية التكا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية