موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:25 دقيقة • July 8th, 2025
في الخلايا النشطة الأيضية ، تتأكسد الركائز المحتوية على الكربون عبر سلسلة من التفاعلات الكيميائية الحيوية لتوليد الطاقة وإطلاق ثاني أكسيد الكربون كمنتج ثانوي.
لتحديد معدل أكسدة الركيزة ، ابدأ بثقافة ملتصقة للخلايا غير المتمايزة المرغوبة. استكمل الخلايا في وسط بركيزة مناسبة تحتوي على الكربون المشع أربعة عشر في عمودها الفقري ، واحتضنها.
تستهلك الخلايا الركيزة وتأكسدها لإطلاق ثاني أكسيد الكربون المليء بالإشعاع ، والذي ينتشر من الخلايا إلى الوسط المحيط.
انقل هذا الوسيط إلى مجموعة حبس الغاز تحتوي على حمض البيركلوريك لإخماد التفاعل. يحتوي هذا الأنبوب على ورق ترشيح مبلل بهيدروكسيد الصوديوم مثبت داخل غطاء الأنبوب. أغلق الغطاء واحتضن.
أثناء الحضانة ، يطلق ثاني أكسيد الكربون ، في شكله الغازي ، داخل الأنبوب. يمتص هيدروكسيد الصوديوم ثاني أكسيد الكربون الملصق بالإشعاع ، ويحاصره في ورق الترشيح. انقل ورق الترشيح هذا إلى قارورة تحتوي على كوكتيل متلألئ ، وضعه داخل عداد التلألؤ السائل.
داخل المنضدة ، يخضع الكربون المصنف بالإشعاع للاضمحلال الإشعاعي ، مما ينبعث منه جزيئات بيتا عالية الطاقة. يتم امتصاص هذه الجسيمات بواسطة مكونات كوكتيل التلألؤ وتنبعث منها نبضات ضوئية يتم حسابها بواسطة عداد التلألؤ.
ترتبط كمية النشاط الإشعاعي المكتشفة بمعدل أكسدة الركيزة في الخلايا.
اغسل الخلايا في الآبار الإضافية مرتين
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية