موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:49 دقيقة • July 8th, 2025
الإنزيمات المهينة للكربوهيدرات على تكسير السكريات المعقدة إلى السكريات قليلة السكاريد الأصغر.
لفحص نشاط تحلل الإنزيم ، ابدأ بتناول العديد من الهلاميات المائية البوليمرية الملونة ، CPH ، والتي يتم تحضيرها عن طريق صباغة السكريات بأصباغ الكلوروتريازين ذات الألوان المختلفة. ثم يتم ربط كل عديد السكاريد كيميائيا لتشكيل هيدروجيل - ركيزة اصطناعية للتحلل الأنزيمي.
الآن ، قم بتوزيع ركائز CPH المختلفة في آبار مميزة للوحة تفاعل مسامية. أضف محلول تنشيط واحتضانه لضمان التنشيط الأمثل للركائز.
ضع لوحة الفحص فوق لوحة منتج فارغة. قم بالطرد المركزي للألواح معا بسرعة منخفضة لتسهيل الإزالة الفعالة لمحلول التنشيط من خلال مسام لوحة التفاعل.
بعد ذلك ، استكمل جميع آبار لوحة التفاعل بنفس النوع من الإنزيم المتحلل للكربوهيدرات في مخزن مؤقت مناسب يحافظ على درجة الحموضة المثلى للنشاط الأنزيمي. أغلق اللوحة واحتضانها بتحريض خفيف للسماح بتوزيع موحد للإنزيمات في الشبكة البوليمرية ، مما يسمح لها بالوصول إلى الركيزة.
أثناء الحضانة ، يقوم الإنزيم ، مع النشاط المناسب ضد الركيزة ، بتحلل السكريات في CPH لإنتاج السكريات قليلة السكاريد المرتبطة بالصبغة. هذه المنتجات قابلة للذوبان ، مما يجعل المحلول ملونا. قم بتدوير الألواح لجمع المحلول الملون في لوحة المنتج.
من الناحية الطيفية ، حدد امتصاص المنتج لقياس نشاط الإنزيم.
ل
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية