فحص الإنزيم القائم على هيدروجيل البوليمر الكروموجينيك: طريقة إنتاجية عالية لفحص الإنزيمات النشطة للكربوهيدرات باستخدام ركائز اصطناعية

0 مشاهدات3:49 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
تعمل

الإنزيمات المهينة للكربوهيدرات على تكسير السكريات المعقدة إلى السكريات قليلة السكاريد الأصغر.

لفحص نشاط تحلل الإنزيم ، ابدأ بتناول العديد من الهلاميات المائية البوليمرية الملونة ، CPH ، والتي يتم تحضيرها عن طريق صباغة السكريات بأصباغ الكلوروتريازين ذات الألوان المختلفة. ثم يتم ربط كل عديد السكاريد كيميائيا لتشكيل هيدروجيل - ركيزة اصطناعية للتحلل الأنزيمي.

الآن ، قم بتوزيع ركائز CPH المختلفة في آبار مميزة للوحة تفاعل مسامية. أضف محلول تنشيط واحتضانه لضمان التنشيط الأمثل للركائز.

ضع لوحة الفحص فوق لوحة منتج فارغة. قم بالطرد المركزي للألواح معا بسرعة منخفضة لتسهيل الإزالة الفعالة لمحلول التنشيط من خلال مسام لوحة التفاعل.

بعد ذلك ، استكمل جميع آبار لوحة التفاعل بنفس النوع من الإنزيم المتحلل للكربوهيدرات في مخزن مؤقت مناسب يحافظ على درجة الحموضة المثلى للنشاط الأنزيمي. أغلق اللوحة واحتضانها بتحريض خفيف للسماح بتوزيع موحد للإنزيمات في الشبكة البوليمرية ، مما يسمح لها بالوصول إلى الركيزة.

أثناء الحضانة ، يقوم الإنزيم ، مع النشاط المناسب ضد الركيزة ، بتحلل السكريات في CPH لإنتاج السكريات قليلة السكاريد المرتبطة بالصبغة. هذه المنتجات قابلة للذوبان ، مما يجعل المحلول ملونا. قم بتدوير الألواح لجمع المحلول الملون في لوحة المنتج.

من الناحية الطيفية ، حدد امتصاص المنتج لقياس نشاط الإنزيم.

للبدء ، قم بتنشيط لوحة مجموعة فحص المرشح المكونة من 96 بئرا عن طريق إضافة 200 ميكرولتر من محلول التنشيط لكل بئر. احتضن في درجة حرارة الغرفة دون تحريض لمدة 10 دقائق.

استخدم جهاز طرد مركزي وأي لوحة قياسية ذات 96 بئرا للتجميع لتدوير محلول التنشيط الموجود. أضف 100 ميكرولتر من الماء المعقم إلى ركائز هيدروجيل البوليمر الكروموجينيك ، أو ركائز CPH ، وقم بتطبيق فراغ أو دوران لإزالة المثبت. كرر الغسيل مرتين أخريين.

لتحضير تفاعل الإنزيم، أضف 150 ميكرولترا من الرقم الهيدروجيني 4.5 لأسيتات الصوديوم سعة 100 ملليمول، و5 ميكرولترات من محلول السليولاز الداخلي بثلاثة تركيزات مختلفة، إلى كل بئر من لوحة مجموعة الفحص.

ضع لوحة المنتج أسفل لوحة مجموعة الفحص لتجميع أي تسرب محتمل من لوحة التفاعل أثناء الاهتزاز. بعد ذلك ، قم باحتضان لوحة مجموعة الفحص في درجة حرارة الغرفة في شاكر أفقي عند 100 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة.

لتلقي بيانات موثوقة ، من الضروري تحريك خليط التفاعل أثناء الحضانة.

ضع لوحة مجموعة الفحص مع لوحة المنتج تحتها في جهاز الطرد المركزي ، وقم بالدوران لأسفل عند 2,700 × جم لمدة 10 دقائق ، لنقل منتج التفاعل إلى آبار لوحة المنتج.

بعد الدوران ، افحص لوحة المنتج بصريا للتأكد من أن حجم السائل في كل بئر متماثل تقريبا. باستخدام قارئ الألواح ، اقرأ امتصاص لوحة التجميع عند 630 نانومتر لركائز CPH الخضراء المختلفة.

08:10

متعدد انزيم الفحص باستخدام عالية الإنتاجية نظام فحص انزيم الوراثية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

14:57

فحص الطيفي لمثبطات محتملة من الجلوتاثيون السيتوسولي S-Transferases

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:20

تفعيل وارتقاط السكريات المتعددة القابلة للذوبان باستخدام 1-سيانو-4-ديميثيلامينوبيريدين تترافلوروبورات (CDAP)

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:21

شاشة إنتاجية عالية للنشاط Biomining سلولاز من مكتبات Metagenomic

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:16

ارتفاع المناولة فحص النشاط Endoglucanase الفطرية في القولونية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

13:37

[ميكروأرس] البوليمر لاكتشاف إنتاجية عالية من المواد الحيوية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:01

الكشف عن تعبير الإنزيم المستهدف في الخلايا البكتيرية المعدلة وراثيا

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:27

فحص الإنزيم القائم على الكتلة الحيوية الكروموجينيك غير القابل للذوبان: اختبار لتقييم نشاط التحلل للإنزيمات المهينة للكتلة الحيوية النباتية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:02

الآلي وحدات إنتاجية عالية Exopolysaccharide فحص منصة مقرونا حساسة للغاية تحليل الكربوهيدرات بصمات الأصابع

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:51

فحص الإنتاجية العالية من الكربوهيدرات المهينة الانزيمات عن طريق رواية غير قابل للذوبان اللونية الركيزة الفحص أطقم

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026