موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:31 دقيقة • July 8th, 2025
الميتوكان هي فئة من الأدوية التي تؤثر بشكل انتقائي على عمل الميتوكوندريا في الخلايا السرطانية وتحفز موت الخلايا المبرمج.
لتحديد السمية الخلوية الميتوكان ، قم بزرع معلق خلوي يحتوي على خلايا سرطانية شبه ملتصقة على صفيحة متعددة الآبار. عالج الطبق بمحلول الميتوكان المطلوب واحتضانه.
يدخل الميتوكان الخلية السرطانية لتعطيل نشاط الميتوكوندريا ، مما يؤدي في النهاية إلى موت الخلايا في الخلايا السرطانية الحساسة للميتوكان. عالج الخلايا بمحلول تلطيخ يحتوي على خليط من صبغة Hoechst ويوديد البروبيديوم.
Hoechst ، وهي صبغة فلورية منفذة للغشاء ، تخترق جميع الخلايا وترتبط بالمنطقة الغنية ب AT من الحمض النووي الخاص بها ، مما يضفي مضان أزرق على نوى الخلايا الحية والميتة.
في المقابل ، يدخل يوديد البروبيديوم ، وهو صبغة فلورية غير منفذة للغشاء ، الخلايا الميتة حصريا من خلال الأجزاء التالفة من أغشيةها. تتقاطع الصبغة بين قواعد الحمض النووي ، مما يضفي مضان أحمر إضافي على الخلايا الميتة. وجود كلتا الصبغتين في نوى هذه الخلايا يجعل الخلايا الميتة تبدو أرجوانية.
قم بالطرد المركزي للوحة بسرعة منخفضة لتسوية الخلايا لتحسين الدقة أثناء التصوير. صورة تحت المجهر الفلوري ، ولاحظ مجموعتين متميزتين من الخلايا. احسب عدد كلا النوعين من الخلايا.
تشيرالنسبة المئوية للخلايا الأرجوانية التي تمثل السكان الموتى مقارنة بإجمالي ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية