مقايسة الربط Annexin V: تقنية قائمة على التألق لتحديد كريات الدم الحمراء المبرمج عن طريق وضع العلامات على الفوسفاتيديل سيرين
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:21 دقيقة • July 8th, 2025
خلال بعض الحالات المرضية ، تخضع كريات الدم الحمراء أو خلايا الدم الحمراء لانكماش الخلايا مصحوبا بنقل الدهون الفوسفورية الغشائية - فوسفاتيديل سيرين - من نشرة الغشاء الداخلية إلى الخارجية ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج ، والتهاب الحمر ، مما يؤدي إلى بلعمة الخلايا بوساطة البلاعم.
لقياس الكريات الحمرية الناجمة عن الأيونوفور في مجموعات كريات الدم الحمراء البشرية المعزولة عن طريق مقايسة ربط Annexin V ، ابدأ بكريات الدم الحمراء المعلقة في مخزن مؤقت خال من الجلوكوز.
يؤدي استنفاد الجلوكوز إلى الإجهاد الخلوي ، مما يؤدي إلى تنشيط بروتين العصارة الخلوية كيناز C ، والذي ينشط لاحقا قنوات الكالسيوم ويسبب تدفق أيونات الكالسيوم. علاوة على ذلك ، يتم تنشيط قنوات البوتاسيوم ، مما يتسبب في تدفق البوتاسيوم وانكماش الخلايا.
بعد ذلك ، أضف أيونوفور الكالسيوم الذي يشكل مركبا مستقرا بأيونات الكالسيوم خارج الخلية. يسهل المركب دخول العصارة الخلوية لأيونات الكالسيوم عبر غشاء الخلية ، مما يزيد من تركيز الكالسيوم داخل الخلايا. وهذا بدوره ينشط scramblase - ناقل فوسفوليبيد ثنائي الاتجاه - والذي يساعد في نقل الفوسفاتيديل سيرين من نشرة غشاء الخلية الداخلية إلى الخارجية ، مما يقلل من عدم تناسق الغشاء ويسبب التهاب الحفراء.
الطرد المركزي كريات الدم الحمراء المعالجة باليونوفور. أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت ملزم يحت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية