قياس تقلص SMC في المختبر: طريقة غير جراحية لتقييم تقلص خلايا العضلات الملساء باستخدام استشعار مقاومة الخلايا الكهربائية للركيزة

0 مشاهدات3:45 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
يحتوي

جدار الشريان الأورطي في الغالب على خلايا عضلية ملساء، أو SMCs، تحتوي على آلية بروتين مقلصة تنقبض وتسترخي لتنظيم تدفق الدم الأبهري.

لقياس الاستجابة الانقباضية ل SMCs الأبهري في المختبر ، احصل على صفيحة متعددة الآبار تحتوي على مجموعة استشعار مقاومة ركيزة الخلية الكهربائية ، أو ECIS. تحتوي كل مجموعة على أقطاب كهربائية من الأغشية الذهبية في قاع البئر ، محددة بغشاء عازل. قم بتغطية الآبار بالجيلاتين.

تعليق SMC البشري الأولي في الآبار. انقل لوحة البئر المحتوية على ECIS إلى حامل لوحة متصل بمكبر للصوت ونظام الحصول على البيانات مع ضمان ملامسة القطب الكهربائي مع الحامل. قم بتطبيق تيار متناوب ثابت صغير بين الأقطاب الكهربائية لقياس الجهد عبرها.

أثناء الحضانة ، تلتصق SMCs وتنتشر على طلاء الجيلاتين. تتصرف الخلايا كعوازل ، مما يحد من تدفق التيار بين الأقطاب الكهربائية. مع ارتباط المزيد من الخلايا بالسطح ، ينخفض التدفق الحالي أكثر. نتيجة لذلك ، فإن المعاوقة أو المعارضة للتدفق الحالي وزيادة محتملة. في النهاية ، تتكاثر الخلايا على الأقطاب الكهربائية وتشكل طبقة أحادية.

عالج SMCs بأيونوفور الكالسيوم لتسهيل نقل أيونات الكالسيوم عبر أغشية الخلايا. ينشط تدفق أيونات الكالسيوم خارج الخلية الجهاز المقلص، مما يؤدي إلى الانكماش.

تنقبض SMCs المحفزة وتفقد الاتصال بالخلية الخلوية على الأقطاب الكهربائية. يؤدي الانخفاض الناتج في تغطية سطح القطب الكهربائي إلى تقليل المعاوقة ، مما يسهل القياس الكمي في الوقت الفعلي لتقلص SMC.

عد الخلايا باستخدام عداد الخلايا الآلي ، وقم بزرع SMCs ثلاث نسخ بكثافة بذر تبلغ 30,000 خلية لكل بئر ، في 200 ميكرولتر من وسط SMC في لوحة ECIS المطلية بالجيلاتين. ضع اللوحة مع SMCs في حامل ECIS 96-well في حاضنة زراعة الخلايا.

انقر نقرا مزدوجا فوق "برنامج ECIS Applied Biophysics software" لفتح البرنامج ، واضغط على زر "الإعداد". تحقق مما إذا كانت جميع الأقطاب الكهربائية على اتصال بالحامل ، في اللوحة السفلية اليسرى المسماة "تكوين البئر". إذا لم يتم توصيل الأقطاب الكهربائية بشكل صحيح ، فاضبط اللوحة في الحامل قبل بدء القياس.

الآن ، حدد نوع اللوحة في نفس اللوحة بالنقر فوق "نوع المصفوفة". بعد ذلك، قم بإعداد ماصتين بحجم 2 ميكرولتر و 150 ميكرولتر. قبل البدء في التحفيز ، اضغط على "علامة" في البرنامج ، ووضع تعليق.

لتحفيز الخلايا ، قم بإزالة الغطاء ، ووضعه على سطح معقم داخل الحاضنة. بعد ذلك ، قم بتحفيز تقلص SMC عن طريق سحب 2 ميكرولتر من محلول عمل الأيونومايسين في كل بئر في أسرع وقت ممكن.

بمجرد تحفيز جميع الخلايا ، امزج الوسط في الآبار باستخدام الماصة الثانية.

07:04

عزل خلايا العضلات الملساء القلبية والوعائية عن أسماك الزرد البالغة واليافعة واليرقات والجنينية للدراسات الكهروفسيولوجية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:56

عزل الشريان الرئوي وخلايا العضلات الملساء للتحقيق في استجابات الأوعية الدموية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:47

بناء نموذج لخلية عضلية ملساء للشريان الأورطي البشري على رقاقة لتلخيص الإجهاد الميكانيكي الحيوي في جدار الأبهر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:30

الكهربائية الخلوي الركيزة مقاومة استشعار لتقدير حجم انتشار غشائي، الحاجز وظيفة، والحركة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:53

استخدام الميكروسكيل السيليكون الكابولي لتقييم مقلص الخلوية وظيفة في المختبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:42

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:19

في المختبر تقييم وظيفة القلب باستخدام خلايا القلب skinned

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:28

عزل خلايا العضلات الملساء الأبهرية الأولية الخاصة بالمريض وقياسات الانقباض شبه الكمية في الوقت الفعلي في المختبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

14:33

تحليل مبسط وعالي الإنتاجية لانقباض الخلية الواحدة باستخدام اللدائن المطاطية ذات الأنماط الدقيقة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:30

التطبيقات التقنية لمصفوفة الأقطاب الدقيقة وتسجيلات المشبك التصحيحي على الخلايا العضلية القلبية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026