فحص المراسل الحيوي: تقنية حساسة تستخدم نظام مراسل الإضاءةالأحيات الحيوية للكشف عن الأجسام المضادة ل SARS-CoV-2
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:11 دقيقة • July 8th, 2025
أثناء عدوى فيروس كورونا 2 ، أو SARS-CoV-2 ، يرتبط مجال ربط مستقبلات بروتين سبايك للفيروس ، RBD ، بالإنزيم المحول للأنجيوتنسين للخلية المضيفة 2 ، ACE2 ، مما يسهل دخول الخلايا الفيروسية. ردا على ذلك ، ينتج الجهاز المناعي أجساما مضادة ترتبط ب RBD الفيروسي وتمنع دخول الخلايا ، مما يقلل من العدوى الفيروسية.
للكشف عن الأجسام المضادة ل SARS-CoV-2 التي تستهدف RBD ، خذ معلق المراسل الحيوي المؤتلف الذي يتكون من شظايا بروتينية صغيرة الحجم ، مدمجة في SARS-CoV-2 spike RBD. أضف الأجسام المضادة القياسية ل SARS-CoV-2 التي تستهدف RBD والخرز المغناطيسي المرتبط بالأجسام المضادة.
أثناء الحضانة ، ترتبط منطقة الجسم المضاد Fc بمجالات ربط Fc للخرز. بالإضافة إلى ذلك ، يرتبط المراسل الحيوي المؤتلف بالأجسام المضادة ل SARS-CoV-2 المرتبطة بالخرز.
بعد الحضانة ، الطرد المركزي الخليط. قم بإزالة المادة الطافية غير المنضومة التي تحتوي على المراسل الحيوي. قم بإعادة تعليق الخرزات المقيدة في المخزن المؤقت. انقله إلى طبق متعدد الآبار.
أضف محلولا يحتوي على شظايا بروتينية كبيرة الحجم ، مع تقارب كبير مع شظايا البروتين صغيرة الحجم. ترتبط شظايا البروتين الكبيرة والصغيرة الحجم ببعضها البعض ، وتشكل إنزيم لوسيفيراز نشط هندسيا.
أضف فوريمازين ، ركيزة لوسيفيراز. يحفز لوسيفيراز أكسدة الفوريماازين ، مما يتسبب في انبعاث الضوء. باستخ
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية