مقايسة المثامرة في المختبر: طريقة لتقييم تأثير الأسموليتات على ثبات البكتيريا

عند التعرض لظروف البيئة الضارة ، تدخل مجموعة فرعية من البكتيريا في حالة من النشاط الأيضي المنخفض ، وتتهرب من الآثار الضارة. يمكن لهذه البكتيريا ، التي تسمى الثباتات ، أن تتحمل التعرض العابر لتركيزات عالية من المضادات الحيوية.

لدراسة تأثير الأسموليتات - المواد المذابة العضوية الصغيرة - على ثبات البكتيريا ، أولا ، احصل على ثقافة الخلايا البكتيرية ذات الطور الأسي مع ثمارات موجودة مسبقا تحت حد الكشف ، معلقة في الوسائط.

بعد ذلك ، انقل التعليق إلى آبار تحتوي على الأوسموليت للوحة المصفوفة الدقيقة. احتفظ بمجموعة من الآبار بدون الأسموليت كمراقبة. أغلق اللوحة بغشاء منفذ للغاز للسماح بانتشار الغاز السريع لنمو الخلايا واحتضانها.

تحفز الأسموليتات الموجودة في الوسط بتركيزات مناسبة الإجهاد التناضحي ، مما يؤدي إلى قيام بعض الخلايا بإعادة برمجة عملية التمثيل الغذائي الخلوي من النمو السريع إلى البطيء ، وتشكيل المثابرات.

الآن ، قم بنقل الخلايا المعالجة بالأسموليت والخلايا الضابطة إلى لوحة فحص ثابتة تحتوي على المضادات الحيوية. ختم لوحة الفحص الثابتة واحتضنها.

في وجود المضادات الحيوية ، تخضع الخلايا الطبيعية لموت الخلايا ، في حين أن المثابرين - الذين يتحملون المضادات الحيوية - على قيد الحياة. أخيرا ، اجمع جزءا صغيرا من الخلايا ، وتخفيفه بشكل متسلسل باستخدام المخزن المؤقت ، ثم ضع على صفيحة أجار خالية من