مقايسة الحضانة المشتركة للبكتيريا: تقنية قائمة على الفحص المجهري الفلوري لتصور المنافسة البكتيرية غير المحددة على مستوى الخلية المفردة
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:55 دقيقة • July 8th, 2025
تتسبب المنافسة غير المحددة بين سلالتين بكتيريتين في قيام السلالة المثبطة بإطلاق جزيئات مستجيبة سامة تقتل السكان المستهدفين.
لتصور التفاعلات التنافسية بين سلالتين بكتيريتين سالبة الجرام ، ابدأ بثقافة مشتركة تشتمل على مثبط وسلالة مستهدفة بكميات متساوية.
تم تصميم كلتا السلالتين للتعبير عن بروتينات الفلورسنت ذات الألوان المختلفة للتمييز بينهما بصريا أثناء التصوير. تركيز المزرعة لزيادة التلامس بين الخلايا بين السلالات البكتيرية. ضع المزرعة المختلطة على غطاء يوضع في قاع الطبق.
ضع وسادة من الاغاروز الصلبة فوق البقعة ، مما يسمح للبكتيريا بتثبيت الحركة ، وقم بتغطيتها بغطاء آخر. احتضان للسماح بنمو البكتيريا ، ومحاكاة ظروف الازدحام البكتيري.
يحتويغلاف الخلية للسلالة المثبطة على نظام إفرازي متخصص - نظام إفراز من النوع السادس ، أو T6SS. وهو يتألف من مجمع غشاء ، وصفيحة أساسية ، وأنبوب داخلي محاط بغمد مقلص.
عند اكتشاف التلامس ، تنشط سلالة المثبط T6SS ، مما يتسبب في تقلص الغمد وطرد الأنبوب ، مما يؤدي في النهاية إلى ثقب غشاء الخلية البكتيرية المستهدفة. هذا يسهل توصيل جزيئات المستجيب إلى البكتيريا المستهدفة ، مما يؤدي إلى موتها.
صورة باستخدام مجهر مضان لتحديد السلالات البكتيرية الفلورية بشكل مختلف. يؤكد التشكل الدائري للبكتيريا المستهدفة وتقليل عددها القتل الناجح بواسطة البكتيريا المثبطة.
قياس وتسج
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية