فحص لويحات الفيروس: تقنية لقياس فيروس الهربس البسيط المعدي عن طريق القياس الكمي للويحات المتكونة في طبقة أحادية من الخلايا المصابة بالفيروس

للبدء ، قم بإعداد التخفيفات المتسلسلة لفيروس الهربس البسيط ، وهو فيروس معد مغلف ، في المخزن المؤقت.

احصل على صفيحة متعددة الآبار تحتوي على طبقة أحادية من زراعة الخلايا الظهارية المعرضة للفيروسات. استبدل حجما معدلا من الوسائط بمعلقات فيروسية مخففة، مما يضمن تغطية أحادية الطبقة. اسمح للفيروس بالامتصاص على سطح الخلية.

قم بإزالة أي فيروسات غير ممتصة. قم بتغطية طبقة الخلية أحادية الطبقة بوسائط تحتوي على ميثيل السليلوز ، لتشكيل تراكب شبه صلب.

عند الحضانة ، يندمج الغلاف الفيروسي وغشاء الخلية ، مما يؤدي إلى إطلاق النوكليوكابسيد الفيروسي الذي يحيط بالجينوم مزدوج الشريطة في السيتوبلازم. علاوة على ذلك ، يتم إطلاق الجينوم الفيروسي في نواة الخلية.

باستخدام الآلية الخلوية للمضيف وبروتين الفيروس ، يعبر الجينوم الفيروسي عن البروتينات الفيروسية المبكرة الفورية ، والتي تنظم التعبير عن الجينات المبكرة. تتوسط البروتينات الفيروسية المبكرة في تكرار الحمض النووي الفيروسي.

بعد ذلك ، تعبر الجينات الفيروسية المتأخرة عن البروتينات الهيكلية ، والتي تتجمع جنبا إلى جنب مع الجينوم الفيروسي لإنتاج جزيئات فيريون ذرية. الخلايا المصابة بالفيروس تتحلل وتطلق الفيروسات.

يقيد ميثيل السليلوز حركة الفيروس ، مما يتسبب في إصابة الفيروسات بالخلايا المجاورة فقط والتحلل اللاحق ، مما يخلق ثقوبا في الطبقة الأحادية.

بعد الحضانة ،