موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:48 دقيقة • July 8th, 2025
البلاعم هي خلايا مناعية متخصصة تزيل الخلايا التي تخضع لموت الخلايا المبرمج - موت الخلايا المبرمج عن طريق البلعمة.
لتقييم ابتلاع الخلايا المبرمجة ، ابدأ بشريحة زجاجية تحتوي على ذبابة الفاكهة الخلايا الجنينية الثابتة ، بما في ذلك الأجسام موت الخلايا المبرمج التي تبتلعها الخلايا الدموية - البلاعم اللافقارية.
أولا ، عالج الخلايا بكاشف مانع يحجب المواقع غير المحددة. أضف الأجسام المضادة الأولية التي تربط مستقبلات الكروكيمورت - علامات البلعمة للخلايا الدموية. اغسل الأجسام المضادة الزائدة.
أضف الأجسام المضادة الثانوية المسماة بالفوسفاتيز القلوية والتي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية. الآن ، أضف محلول ركيزة كروموجينيك مناسب على الشريحة ، واحتضنها. أثناء الحضانة ، يتفاعل الفوسفاتيز القلوي مع الركيزة الكروموجينيكية لإنتاج حبيبات ملطخة باللون الأرجواني في الخلايا الدموية.
بعد ذلك ، أضف خليط تفاعل يتكون من ديوكسينوكليوتيديل ترانسفيراز طرفي ، وإنزيم TdT ، والنيوكليوتيدات المرتبطة بالديجوكسيجينين. يحفز TdT ارتباط النيوكليوتيدات المرتبطة بالديجوكسيجينين بنهايات 3 'OH المكشوفة للحمض النووي المجزأ في الأجسام موت الخلايا المبرمج.
بعد ذلك ، أضف الأجسام المضادة للديجوكسيجينين المقترنة بمراسل البيروكسيداز التي ترتبط بالنيوكليوتيدات في موقع تلف الحمض النووي. عالج الخلايا بمحلول ركيزة كروموجينيك خاص بالبير
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية