اختبار لوسيفيراز لدراسة فعالية المواد الكيميائية المضادة للطفيليات ضد الطفيليات

تتكاثر التوكسوبلازما جوندي — طفيلي أولي — حصريا داخل الخلايا المضيفة للحيوانات ذات النواة. يغزو الخلايا المضيفة من خلال عملية الخلايا الداخلية ، مكونا فجوة طفيلية. داخل الفجوة ، يبتلع الطفيل بروتينات العصارة الخلوية المضيفة ، ويكتسب العناصر الغذائية للنمو.

لفحص فعالية المواد الكيميائية المضادة للطفيليات على الطفيليات داخل الخلايا المضيفة ، خذ لوحة فحص تحتوي على مزرعة ملتصقة للأرومات الليفية للقلفة البشرية في آبار متعددة.

قم بتوزيع كميات متساوية من طفيليات التوكسوبلازما التي تعبر عن لوسيفيراز - إنزيم منتج للتلألؤ - في كل بئر. احتضان ، مما يسمح للطفيليات بغزو الخلايا المضيفة والنمو داخل الفجوة الطفيلية.

بعد الحضانة ، استنشق الوسط ، وإزالة الطفيليات غير المبتلعة. استكمال الآبار بتركيزات مختلفة من المركب المضاد للطفيليات الذي يستهدف البروتياز السيستين ، واحتضانه.

تدخل جزيئات الدواء إلى الخلية المضيفة للوصول إلى الطفيليات. بمجرد دخوله ، يثبط الدواء إنزيم البروتياز السيستين الموجود في الطفيلي ، مما يعطل اكتساب المغذيات للطفيلي المرتبط بالمضيف ويوقف نموه.

استنشق الوسائط المحتوية على الدواء. أضف مخزن مؤقت للفحص يحتوي على ركيزة خاصة بإنزيم لوسيفيراز. تعمل المكونات العازلة على تحلل الخلايا ، مما يسمح لإنزيم لوسيفيراز الطفيلي بأكسدة الركيزة ، مما ينتج عنه تلألؤ ساطع.

قياس اللمعان لجميع تركيزا