اختبار قائم على اللوحة لقياس إطلاق أحادي الأمين من شرائح الدماغ عند اختبار التعرض للأدوية
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:00 دقيقة • July 8th, 2025
الناقلات العصبية أحادية الأمين ، الرسل الكيميائي الداخلي ، تنقل الإشارات عبر المشبك ، نقطة الاتصال بين الخلايا العصبية. نظام الناقل العصبي أحادي الأمين المنظم بإحكام ضروري لوظيفة الخلايا العصبية الطبيعية.
لفحص تأثير دواء الاختبار على إطلاق أحادي الأمين خارج الجسم الحي ، احصل على شرائح أنسجة دماغ الفئران التي تحتوي على منطقة الاهتمام في مخزن مؤقت مؤكسج مبرد ، مما يحافظ على بقاء الأنسجة.
انقل شرائح الأنسجة إلى آبار صفيحة متعددة الآبار ، مع إدخالات مرشح مسامية متصلة بإمداد خليط غازي وتتكون من السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي المؤكسج ، aCSF ، مكمل بمثبطات أوكسيديز أحادي الأمين. حضن.
تنتشر المثبطات في الخلايا وتعطل إنزيمات أوكسيديز أحادي الأمين ، مما يمنع تحلل أحادي الأمين ويزيد من تركيزها المتاح للتخزين والإفراج.
نقل الإدخالات المحتوية على الأنسجة إلى الآبار التي تشتمل على aCSF المؤكسج ، وعقار الاختبار. حضن. قد يحفز الدواء نظام الناقل العصبي أحادي الأمين ، مما يزيد من تركيز أحادي الأمين في الفضاء الخارجي للخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى إطلاقها من أنسجة المخ إلى المحلول.
تمر أحاديات الأمين التي تم إطلاقها عبر الإدخالات المسامية إلى الآبار ، وتنفصل عن الأنسجة.
بعد الحضانة ، قم بإزالة الحشوات التي تحتوي على شريحة الأنسجة. اجمع محلول أحادي الأمين في أنبوب يتكون من مذيب متوافق مع كروماتوغراف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية