التحليل القائم على المعاوقة الخلوية لمراقبة العمليات الخلوية في الوقت الفعلي

للقياس المستمر لسلوك الخلية باستخدام تحليل الخلية في الوقت الفعلي ، RTCA ، احصل على صفيحة RTCA microtiter تحتوي على مصفوفات أقطاب كهربائية دقيقة ذهبية لقياس مقاومة مدمجة في قاع البئر. أضف بعناية وسط زراعة الخلايا إلى الآبار.

داخل الوسط الموصل للكهرباء ، قم بتطبيق جهد كهربائي ضعيف عبر الأقطاب الكهربائية الدقيقة. يتسبب الجهد في تدفق التيار الكهربائي بين الأقطاب الكهربائية الدقيقة ، مما يسهل قياس مقاومة خط الأساس - المقاومة الكهربائية المتأصلة في الوسط.

ماصة التركيزات المطلوبة من تعليق خلايا الثدييات إلى الآبار المحتوية على المتوسطة. اسمح للخلايا بالتوزيع بشكل موحد في البئر.

أثناء الحضانة ، تلتصق الخلايا بقاع البئر. تعمل الخلايا الملتصقة على الأقطاب الكهربائية الدقيقة كعازل ، مما يحد من تدفق التيار ويزيد من المقاومة.

تدريجيا ، تتكاثر الخلايا على الأقطاب الكهربائية الدقيقة ، مما يؤدي إلى زيادة المعاوقة الأسية.

بعد تكوين طبقة الخلية المتقاربة ، تواجه الخلايا الحرمان من المغذيات وتخضع للموت. نتيجة لذلك ، تنفصل الخلايا عن الأقطاب الكهربائية الدقيقة ، مما يقلل من المقاومة.

يسهل

قياس المعاوقة المستمر المراقبة في الوقت الفعلي للأحداث الخلوية ، بما في ذلك تكاثر الخلايا وموتها.

لتحديد كمية الخلية المناسبة لعدوى الخلايا ، قم بإعداد مزارع خلايا MDCK ملتقية على مدار 24 ساعة ، حوالي 80٪ ، كما هو م