موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:52 دقيقة • July 8th, 2025
هرمونات الإستروجين هي هرمونات ستيرويد تعمل كجزيئات إشارات الغدد الصماء وترتبط بالمستقبلات النووية - مستقبلات هرمون الاستروجين بيتا ، وتشكل مجمعات مستقبلات هرمون الاستروجين بيتا.
تتضاءل مجمعات مستقبلات الترابط هذه وتشكل متجانسات في سيتوبلازم الخلية. يدخل المتجانس الناتج إلى النواة ، ويرتبط بعنصر استجابة هرمون الاستروجين ، و ERE - تسلسل محدد للحمض النووي داخل محفز الجين المستهدف - ويبدأ النسخ.
لتحديد نشاط الاستروجين للاستروجين النباتي - مستقلبات ثانوية مشتقة من النباتات تحاكي وظيفة هرمون الاستروجين - ابدأ بصيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا مراسل معلقة في وسط مناسب.
تم تصميم خلايا المراسل للإفراط في التعبير عن مستقبلات هرمون الاستروجين بيتا ونقلها بجين لوسيفيراز مدمج في محفز ERE. أضف محلول العينة الذي يحتوي على فيتويستروغنز واحتضن.
أثناء الحضانة ، يرتبط هرمون الاستروجين النباتي بمستقبلات هرمون الاستروجين ، بيتا - معبرا عنها في خلايا المراسل. بمجرد ربطها ، تتضاءل مجمعات مستقبلات الاستروجين النباتي وتنتقل إلى النواة.
داخل النواة ، يرتبط المركب الخافت ب ERE. يبدأ الارتباط في نسخ جين لوسيفيراز ، مما ينتج عنه إنزيم لوسيفيراز. بعد ذلك ، قم بإزالة الوسيط وأضف كاشفا يحتوي على ركيزة لوسيفيراز. احتضان للسماح لإنزيم لوسيفيراز المعبر عنه بأكسدة ركيزته وإنتاج اللمعان.
قياس اللمعان ، مما يؤكد نشاط
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية