الفحص القائم على اللمعان لتقييم السمية العصبية لمركبات الاختبار على الخلايا العصبية

يعد نمو العصبيات - حيث تطور الخلايا العصبية الإسقاطات - أمرا بالغ الأهمية للوظيفة العصبية والتجديد.

لتقييم التأثيرات السمية العصبية لمركبات الاختبار المعززة لنمو الخلايا العصبية في المختبر ، احصل على خلية سلف عصبية بشرية ، hNPC ، تعليق في وسائط التمايز.

قم بزرع الخلايا في آبار صفائح متعددة الآبار مغطاة ببولي إل ليسين ولامينين ، مما يسهل ارتباط الخلية بقاع البئر ويدعم النمو الخلوي. تعزز مكونات وسائط التمايز تمايز hNPC إلى خلايا عصبية.

عالج مجموعة واحدة من الآبار بمركب اختبار تعزيز نمو العصب. يتفاعل هذا مع الخلايا العصبية المشتقة من hNPC وقد يحفز نمو العصبية, دون تعطيل عمليات التمثيل الغذائي الخلوية والتركيز اللاحق من أدينوسين ثلاثي الفوسفات, ATP — مصدر الطاقة الخلوية الأساسي.

أضف الكاشف أحادي الخطوة الذي يحتوي على المنظفات وإنزيم لوسيفيراز وركيزة لوسيفيراز ومثبطات اللوسيفيرين و ATPase جنبا إلى جنب مع أيونات المغنيسيوم واخلطها.

تعطل المنظفات الغشاء الخلوي ، مما يؤدي إلى تحلل الخلايا وإطلاق ATP داخل الخلايا في المحلول. تمنع مثبطات ATPase ATPase الذاتية المنبعثة ، والتي قد تتداخل مع قياس ATP. أجهزة الطرد المركزي ، ترسيب حطام الخلية.

أثناء الحضانة ، يتسبب ATP الذي تم إطلاقه مع أيونات المغنيسيوم في ارتباط لوسيفيرين باللوسيفيراز ، مما يؤدي إلى أكسدة لوسيفيرين في أوكسيلوسيفيرين شديد الإثار