موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:43 دقيقة • July 8th, 2025
مواقع الالتهاب على خلايا مناعية مختلفة ، بما في ذلك الخلايا الوحيدة والضامة والكريات البيض.
لتحديد مجموعة الخلايا غير المتجانسة عن طريق النشاف الغربي أحادي الخلية ، خذ شريحة نشاف مرطبة مسبقا ، تتكون من هلام بولي أكريلاميد قابل للتنشيط الضوئي منقوش في كتل. تحتوي كل كتلة على العديد من الآبار الصغيرة. يلتقط الزخرفة في عدة كتل خلايا متعددة بالتوازي.
أضف معلقا يحتوي على مجموعة خلايا غير متجانسة. تسمح أبعاد البئر للخلايا المفردة بالاستقرار. اغمر الشريحة في غرفة الرحلان الكهربائي مملوءة بمخزن مؤقت مناسب. تعمل جزيئات المنظفات الموجودة في المخزن المؤقت على تعطيل غشاء الخلية ، وتطلق محتويات خلوية.
تطبيق مجال كهربائي. تهاجر البروتينات المنبعثة عبر الهلام ، وتنقسم إلى نطاقات مميزة الحجم. اغسل الشريحة بمخزن مؤقت للغسيل لإزالة الجزيئات غير المرتبطة على وجه التحديد ، مع ترك البروتينات الخلوية فقط ، بما في ذلك بروتينات العلامات المطلوبة.
قم بتعريض الجل للأشعة فوق البنفسجية ، وتنشيط سطحه وشل حركة البروتينات.
أضف مزيجا من الأجسام المضادة الأولية التي ترتبط على وجه التحديد ببروتينات العلامات المميزة لكل نوع من أنواع الخلايا ، وتشكل مجمعات الأجسام المضادة الأولية للبروتين. استغن عن مزيج من الأجسام المضادة الثانوية ذات العلامات الفلورية ، والتي تربط الأجسام المضادة الأولية الخاصة بها ، مع تسمية ب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية