موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 6:43 دقيقة • July 8th, 2025
تفاعلات البروتين والبروتين ، PPIs ، ضرورية في تنظيم معظم العمليات البيولوجية.
للكشف عن PPIs باستخدام الاستشعار الحيوي للتأثير الميداني ، ابدأ بشريحة ترانزستور تأثير مجال الجرافين. تتكون الشريحة من سطح الجرافين الوظيفي بالكربوكسيل كقناة شبه موصلة بين أقطاب المصدر والتصريف.
احتضان الرقاقة بمحلول جديد من carbodiimide و N-hydroxysulfosuccinimide ، sulfo-NHS ، في مخزن مؤقت zwitterionic. يخلق هذا المخزن المؤقت درجة حموضة مناسبة ، مما يمكن carbodiimide و sulfo-NHS من تنشيط مجموعات الكربوكسيل الوظيفية للرقاقة ، وتشكيل استرات تفاعلية مع الأمين.
أضف محلول البروتين المستهدف. تتفاعل الأمينات الأولية مع الإسترات المتفاعلة مع الأمين ، مما يؤدي إلى شل حركة البروتينات الموجودة على الرقاقة من خلال تكوين رابطة أميد. أضف محلول التبريد المحتوي على الأمين لمنع استرات الأمين التفاعلية غير المرتبطة ، مما يمنع الارتباط غير المحدد.
أدخل الشريحة في القارئ الإلكتروني وقم بمعايرتها باستخدام مخزن مؤقت. يطبق القارئ جهدا ثابتا بين الأقطاب الكهربائية. يتم قياس تدفق التيار الكهربائي الناتج بين الأقطاب الكهربائية في حالة التحليل غير المرتبط.
أضف أقل تركيز للتحليل الكيميائي. يغير التفاعل بين البروتينات التحليلية والأهداف المثبتة على الرقاقة توزيع الشحنة المحلية لسطح الجرافين ، المسجل على أنه استجابة I - التغيي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية